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本研究以人肝癌细胞株HepG2为靶细胞,对苦参碱和氧化苦参碱在体外的抗癌作用进行系统的比较研究,旨在揭示二者的抗肿瘤作用中存在的确切差异,并探讨其可能的作用机制。以期为进一步提高肝癌治疗效果及开发更有效的抗癌新药提供参考。1、采用MTT法检测苦参碱和氧化苦参碱对HepG2细胞增殖的抑制作用。实验组苦参碱和氧化苦参碱终浓度均依次为0.3、0.5、0.8、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5g/L,另设高浓度氧化苦参碱组终浓度分别为5.0、6.0,7.0、8.0、10.0、15.0g/L,培养24h～96h,每24h检测其MTT值。结果显示,作用细胞24h时,作用浓度大于等于为3.0g/L时,苦参碱对细胞的抑制作用均显著大于同浓度下的氧化苦参碱（p<0.05）;作用细胞72h,作用浓度大于等于1.5g/L,苦参碱对细胞的抑制作用均显著大于同浓度下的氧化苦参碱（p<0.05）;作用48h,96h后无论哪个浓度下的苦参碱对细胞的抑制率均显著大于同浓度下的氧化苦参碱（p<0.05）。2、台盼蓝拒染法观察细胞坏死情况。实验组苦参碱和氧化苦参碱浓度均依次为0.5、1.0、2.0、2.5g/L,作用细胞24～96h。结果显示,苦参碱和氧化苦参碱浓度为2.5g/L时,表现为氧化苦参碱实验组活细胞数量大于苦参碱实验组且差异显著（p<0.05）,此时死细胞数量则是苦参碱实验组大于氧化参碱实验组,组间比较也具有显著性意义（p<0.05）。3、以浓度梯度为0.5、1.0、2.0g/L的苦参碱和氧化苦参碱分别连续作用于HepG2细胞,每隔2h检测细胞贴壁情况,观察苦参碱和氧化苦参碱对细胞贴壁能力的影响。结果显示:苦参碱和氧化苦参碱在浓度为0.5g/L时均有促进细胞贴壁和增殖的能力,但氧化苦参碱的促进作用强于苦参碱,且作用16h,二者存在显著性差异（p<0.05）。随着浓度的增大,二者对细胞的贴壁和增殖能力促进作用渐弱,2.0g/L时,二者均表现为抑制细胞的贴壁和增殖,此时苦参碱对细胞的抑制作用强于氧化苦参碱。且作用24h,二者具有显著性意义（p<0.05）。4、分别观察经苦参碱和氧化苦参碱作用后的活细胞及HE染色细胞形态变化。苦参碱和氧化苦参碱终浓度分别为0.1、0.3、0.5、0.8、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、5.0、8.0、10.0g/L,结果显示:作用相同时间,同浓度下苦参碱对细胞形态变化影响作用明显大于氧化苦参碱。苦参碱浓度为3.0g/L时,作用72h后,细胞表现为浆内呈空泡状,染色质呈粗颗粒状,部分细胞膜破裂,此时氧化苦参碱对细胞形态的影响则不明显,细胞仅表现为分散生长。5、通过免疫组化法检测细胞肿瘤相关蛋白表达。苦参碱和氧化苦参碱终浓度分别为0.8、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、5.0、8.0、10.0g/L。作用细胞72h后观察。结果显示:二者均可使癌基因蛋白P53、Bcl-2和增殖相关蛋白AFP、PCNA的表达下调,同时上调抑癌基因蛋白Bax表达。但苦参碱对肿瘤相关基因蛋白的影响强于氧化苦参碱。