长链非编码RNA PAN3-AS1在急性髓系白血病患者中的作用研究

来源 :济宁医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:scutzq
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目的:明确长链非编码PAN3-AS1(lnc RNA PAN3-AS1)在AML患者中的表达水平,并分析其表达水平对AML患者的临床特征、治疗疗效及预后的影响。进一步观察PAN3-AS1对AML细胞株生物学功能的影响,并探索PAN3-AS1与PAN3表达的相关性。方法:1.收集济宁市第一人民医院血液内科自2020年2月至2022年3月初诊的45例AML患者及25例缺铁性贫血患者的骨髓标本,分离单个核细胞,提取总RNA,采用qRT-PCR方法检测PAN3-AS1的表达量,比较两组间PAN3-AS1的表达差异,并根据PAN3-AS1表达量的中值将AML患者分为高表达组及低表达组,比较两组患者临床特征、治疗疗效及预后方面的差异。2.体外培养HL-60细胞株,分别采用si RNA干扰技术敲低PAN3-AS1表达,及慢病毒转染技术使PAN3-AS1过表达,然后分别采用CCK8增殖实验、transwell实验及流式细胞术检测PAN3-AS1对HL-60细胞株增殖、迁移、侵袭、凋亡及细胞周期生物学功能的影响。3.采用qRT-PCR方法检测AML患者骨髓单个核细胞中PAN3-AS1及PAN3的表达,并分析两者表达水平的相关性。进一步检测PAN3-AS1过表达后AML细胞株中PAN3的表达水平。结果:1.PAN3-AS1在AML患者中的表达情况及对临床特征的影响1.1与对照组相比,初诊AML患者中PAN3-AS1表达明显升高(P=0.011)。1.2与低表达组相比,PAN3-AS1高表达组患者的骨髓原始细胞比例更高(P=0.040),更容易表达CD4、CD9、CD36(P=0.027、0.031、0.027),而低表达CD7(P=0.009),更容易发生FLT3-ITD突变(P=0.017)。1.3 PAN3-AS1低表达和高表达组患者对诱导治疗的疗效及预后无显著差异(P>0.05)。2.PAN3-AS1对AML细胞株生物学特性的影响2.1 CCK8检测细胞增殖实验显示:与对照组相比,PAN3-AS1敲低组的HL-60细胞的增殖能力下降(P<0.05),而PAN3-AS1过表达组细胞增殖能力较对照组增强(P<0.05)。2.2 Transwell迁移和侵袭实验显示:与对照组相比,PAN3-AS1敲低组HL-60细胞的迁移及侵袭能力降低(P<0.05),而PAN3-AS1过表达组细胞迁移及侵袭能力较对照组增强(P<0.05)。2.3流式细胞术测细胞凋亡及周期显示,与对照组相比,PAN3-AS1过表达组细胞凋亡比例显著降低(P<0.05),S期细胞数量显著增多(P<0.05)。3.PAN3-AS1与PAN3表达的相关性AML患者骨髓标本中PAN3-AS1与PAN3表达具有正相关性(r=0.704,P<0.001),PAN3-AS1过表达后的AML细胞中PAN3表达亦上升(P<0.05)。结论:1.PAN3-AS1在AML患者中高表达,高表达组患者有更高的骨髓原始细胞比例、高表达CD4、CD9、CD36,低表达CD7,且更容易伴发FLT3-ITD基因突变。2.PAN3-AS1在AML细胞株中高表达,并可以促进细胞增殖、迁移、侵袭,抑制细胞凋亡,解除细胞周期阻滞,发挥癌基因作用。3.PAN3-AS1与PAN3表达成正相关。
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