背景和目的：宫颈癌的发病率在女性恶性肿瘤中居第二位,近年来随着宫颈脱落细胞学检查的广泛应用,宫颈癌的检出率大大增加。而宫颈鳞癌是宫颈癌中最常见的病理类型,具有侵袭性和转移性强的特点,虽然传统的手术、放化疗等多种治疗措施的综合应用已经显著的提高了患者的生存质量,但宫颈癌的浸润和转移仍是许多患者治疗失败和死亡的主要原因。目前,宫颈癌的诊断已不是难事,继续认识宫颈鳞癌肿瘤细胞的生物学行为,探讨其浸润和转移的机制,寻找抑制其浸润和转移的特定基因靶点,开发新的抗肿瘤生物工程药物,是目前的亟待要解决的重点问题。肿瘤的发生发展、浸润、转移是一个多阶段、多步骤、多因素参与的长期复杂过程,原癌基因的激活、抑癌基因的失活和由此造成多种蛋白因子的过度表达或缺失,都参与了这个过程。膜联蛋白Annexin A2是Ca2+介导的磷脂结合蛋白,参与形成细胞膜的骨架、膜聚合、胞吞和胞吐等一系列依赖于Ca2+的生理活动,研究发现Annexin A2可以在肿瘤细胞表面结合组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)、纤溶酶原(PLG)、纤溶酶、细胞粘合素C、组织蛋白酶B、S100A4、腱糖蛋白-C (TN-C)等多种因子共区域化,激发酶促反应,进而降解细胞外基质,加速肿瘤细胞向周围组织浸润、淋巴结及远处转移。CD147,细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix metalloProteinase inducer),是种在胞膜表面广泛表达的单次Ⅰ型跨膜糖蛋白,属于免疫球蛋白超家族(immunoglobulin superfamily, IgSF)成员,CD147可以诱导肿瘤细胞及周围的成纤维细胞分泌MMPs,包括：MMP-K MMP-2、MMP-3、MMP-9、MMP-11等,而后者几乎能够降解细胞外基质的所有成分,近年来的大量研究发现,CD147在多种肿瘤细胞中呈现高表达。MMP-2,又称为明胶酶A,是MMPs家族的重要成员之一,可以降解明胶,Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型胶原,FN和弹性纤维等多种成分,活化的MMP-2富集于细胞穿透基质的突出部位,在酶解细胞间基质及基底膜的主要成分过程中起主要的作用。关于联合检测Annexin A2、CD147、MMP-2在宫颈鳞癌组织中的表达情况以及三者与肿瘤发生发展关系的研究,尚未见文献报道。本实验采用免疫组织化学SP法检测了Annexin A2、CD147、MMP-2在14例宫颈正常鳞状上皮组织、31例宫颈上皮内瘤变(CIN)组织和39例宫颈鳞癌组织中表达情况,旨在通过分析三者的表达与宫颈鳞癌各临床病理资料的联系,探讨三者之间的相关关系和可能存在的作用机制,以期找到能够评价宫颈癌临床特征和恶性程度的蛋白因子,探索宫颈癌基因治疗的新途径。方法：1.采用免疫组织化学SP方法分别检测14例宫颈正常鳞状上皮组织、31例宫颈上皮内瘤变(CIN)组织和39例宫颈鳞癌组织中Annexin A2、CD147、MMP-2的表达情况。2.统计学处理：所有数据均应用SPSS17.0统计学软件处理,阳性率的比较采用x2检验(chi-square),表达强度的比较采用两组独立样本的Wiloxon秩和检验或多组有序分类资料的Kruskal Wall is H秩和检验。阳性率的相关分析采用2×2或3×2列联表的关联分析,表达强度的相关分析采用Spearman秩相关分析。显著性水准为α=0.05。结果：1. Annexin A2蛋白在宫颈正常鳞状上皮组织、宫颈上皮内瘤变(CIN)组织和宫颈鳞癌组织的阳性表达率分别为35.71%(5/14)、61.2996(19/31)、89.74%(35/39)。Annexin A2蛋白在宫颈正常鳞状上皮组织、CIN组织中的阳性表达率和表达强度均明显低于其在宫颈鳞癌组织中的表达,差异均有统计学意义(P<0.05)；两两比较,宫颈正常鳞状上皮组织和CIN组织中Annexin A2的阳性表达率和表达强度的差异无统计学意义(P>0.017),宫颈正常鳞状上皮组织和宫颈鳞癌组织、CIN组织和宫颈鳞癌组织中Annexin A2蛋白阳性表达率和表达强度的差异均有统计学意义(P<0.017)。CIN各级组织中Annexin A2蛋白的阳性表达率和表达强度的差异,无统计学意义(P>0.05)。Annexin A2蛋白的阳性表达率和表达强度与腺体鳞化、腺体累及均无关；Annexin A2蛋白在有腺上皮鳞状上皮化生的患者组织内的阳性表达率是52.38%(11/21),在无腺上皮鳞状上皮化生的患者组织内的阳性表达率是55.56%(5/9),两者比较其阳性率和表达强度的差异均无统计学意义(P=1.000)；Annexin A2蛋白在有腺体累及的患者组织中的阳性表达率是53.85%(7/13),在无腺体累及的患者组织内的阳性表达率是50.00%(1/2),两者比较,其阳性表达率和表达强度的差异无统计学意义(P=1.000)。Annexin A2蛋白的表达与宫颈鳞癌患者的年龄、肿瘤分化等级、淋巴结转移均无关；在年龄<45岁的患者组织中Annexin A2的阳性表达率为88.24%(15/17),在年龄≥45岁的患者组织中其阳性表达率为90.91%(20/22),Annexin A2在两组中阳性率和表达强度的差异无统计学意义(P>0.05)。按照肿瘤的分化程度分类,Annexin A2在Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级组织中的阳性表达率分别是86.67%(13/15)、87.50%(14/16)、100%(8/8),三组之间阳性表达率和表达强度的差异的均无统计学意义(P=0.561)。Annexin A2蛋白在有淋巴结转移组中的阳性表达率为75.00%(12/16),在无淋巴结转移组中的阳性表达率为91.30%(21/23),其阳性表达率和表达强度的差异均无统计学意义(P>0.05)。Annexin A2蛋白的阳性表达率与肿瘤浸润深度呈正相关关系(r阳性率=0.376,P=0.011),在23例肿瘤浸润百分比≥67%的患者组织中,Annexin A2蛋白的阳性表达率为100%(23/23),在16例肿瘤浸润深度百分比<67%的患者组织中,Annexin A2蛋白的阳性表达率为75.00%(12/16),两组比较其阳性率的差异有统计学意义(P<0.05),但表达强度无差异(P>0.05)。2.CD147蛋白在宫颈正常鳞状上皮组织、宫颈上皮内瘤变(CIN)组织和宫颈鳞癌组织的阳性表达率分别为35.71%(5/14)、67.74%(21/31)、89.74%(35/39)。CD147蛋白在宫颈正常鳞状上皮组织、CIN组织中的阳性表达率和表达强度均明显低于其在宫颈鳞癌组织中的表达,差异均有统计学意义(P<0.05)；两两比较,宫颈正常鳞状上皮组织和CIN组织中CD147的阳性表达率和表达强度的差异无统计学意义(P>0.017),C IN组织和宫颈鳞癌组织中CD147蛋白的阳性表达率的差异无统计学意义,但其表达强度的差异有统计学意义(P<0.017)；宫颈正常鳞状上皮组织和宫预鳞癌组织中CD147蛋白阳性表达率和表达强度的差异均有统计学意义(P<0.017)。CIN各级组织中CD147蛋白的阳性表达率和表达强度的差异,无统计学意义(P>0.05)。CD147蛋白的阳性表达率和表达强度与腺体鳞化、腺体累及均无关；CD147蛋白在有腺上皮鳞状上皮化生的患者组织内的阳性表达率是42.86%(9/21),在无腺上皮鳞状上皮化生的患者组织内的阳性表达率是55.56%(5/9),两者比较其阳性率和表达强度的差异均无统计学意义(P=0.694)；CD147蛋白在有腺体累及的患者组织中的阳性表达率是76.92%(10/13),在无腺体累及的患者组织内的阳性表达率是100%(2/2),两者比较,其阳性表达率和表达强度的差异无统计学意义(P=1.000)。CD147蛋白的表达与宫颈鳞癌患者的年龄、肿瘤分化等级、淋巴结转移均无关；在年龄<45岁的患者组织中CD147的阳性表达率为88.24%(15/17),在年龄≥45岁的患者组织中其阳性表达率为90.91%(20/22),CD147在两组中阳性率和表达强度的差异无统计学意义(P>0.05)。按照肿瘤的分化程度分类,CD147在Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级组织中的阳性表达率分别是86.67%(13/15)、87.50%(14/16)、100%(8/8),三组之间阳性表达率和表达强度的差异的均无统计学意义(P=0.561)。CD147蛋白在有淋巴结转移组中的阳性表达率为93.75%(15/16),在无淋巴结转移组中的阳性表达率为86.96%(20/23),其阳性表达率和表达强度的差异均无统计学意义(P>0.05)。CD147蛋白的阳性表达率和表达强度与肿瘤浸润深度均呈正相关关系(r阳性率=0.376,P=0.011；r表达强度=0.421,P=0.008),在23例肿瘤浸润百分比≥67%的患者组织中,CD147蛋白的阳性表达率为100%(23/23),在16例肿瘤浸润深度百分比<67%的患者组织中,CD147蛋白的阳性表达率为75%(12/16),两组比较其阳性率和表达强度的差异均有统计学意义(P<0.05)。3.MMP-2蛋白在宫颈正常鳞状上皮组织、宫颈上皮内瘤变(CIN)组织和宫颈鳞癌组织的阳性表达率分别为14.29%(2/14)、51.61%(16/31)、82.05%(32/39)。MMP-2蛋白在宫颈正常鳞状上皮组织、CIN组织中的阳性表达率和表达强度均明显低于其在宫颈鳞癌组织中的表达,差异均有统计学意义(P<0.05)；两两比较,宫颈正常鳞状上皮组织和CIN组织中MMP-2蛋白的阳性表达率和表达强度的差异无统计学意义(P>0.017),宫颈正常鳞状上皮组织和宫颈鳞癌组织、CIN组织和宫颈鳞癌组织中MMP-2蛋白的阳性表达率和表达强度的差异均有统计学意义(P<0.017)。CIN各级组织中MMP-2蛋白的阳性表达率和表达强度的差异,无统计学意义(P>0.05)。MMP-2蛋白的阳性表达率和表达强度与腺体鳞化、腺体累及均无关；MMP-2蛋白在有腺上皮鳞状上皮化生的患者组织内的阳性表达率是33.33%(7/21),在无腺上皮鳞状上皮化生的患者组织内的阳性表达率是22.22(2/9),两者比较其阳性率和表达强度的差异均无统计学意义(P=0.681)；MMP-2蛋白在有腺体累及的患者组织中的阳性表达率是61.54%(8/13),在无腺体累及的患者组织内的阳性表达率是50.00%(1/2),两者比较,其阳性表达率和表达强度的差异均无统计学意(P=1.000)。MMP-2蛋白的阳性表达率与宫颈鳞癌患者的年龄、肿瘤分化等级、肿瘤浸润深度和淋巴结转移均无关,但其表达强度与肿瘤浸润深度和淋巴结转移有关；在年龄<45岁的患者组织中MMP-2的阳性表达率为88.24%(15/17),在年龄≥45岁的患者组织中其阳性表达率为77.27%(17/22),MMP-2蛋白在两组中阳性表达率和表达强度的差异无统计学意义(P>0.05)；按照肿瘤的分化程度分类,MMP-2在Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级组织中的阳性表达率分别是66.67%(10/15)、87.50%(14/16)、100%(8/8),三组之间阳性表达率和表达强度的差异的均无统计学意义(P=0.106)。MMP-2蛋白在有淋巴结转移组中的阳性表达率为87.50%(14/16),在无淋巴结转移组中的阳性表达率为78.26%(18/23),其阳性表达率的差异无统计学意义(P>0.05)。在23例肿瘤浸润深度百分比≥67%的患者组织中,MMP-2蛋白的阳性表达率为91.30%(21/23)；在16例肿瘤浸润深度百分比<67%的患者组织中,MMP-2蛋白的阳性表达率为68.75%(11/16),两组比较其阳性率的差异无统计学意义(P>0.05)。但MMP-2表达强度与肿瘤浸润深度、淋巴结转移呈正相关关系(r肿瘤浸润深度=0.319,P=0.048；r淋巴结转移=0.327,P=0.042)。4. Annexin A2、CD147和MMP-2的联合表达与腺体鳞化和累及无关。在宫颈鳞癌组织中,同时表达Annexin A2、CD147、MMP-2三种蛋白的阳性率为79.49%(31/39),三者的联合表达与宫颈鳞癌患者的年龄、肿瘤分化等级、淋巴结转移无关,与肿瘤浸润深度密切相关,呈正相关关系。在年龄≥45岁的患者癌组织中,三种蛋白的联合表达阳性率为77.27%(17/22),在年龄<45岁的患者组织中为82.35%(14/17),两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。在肿瘤分化等为Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级的患者组织中,三者的阳性表达率分别为66.67%(10/15)、81.25%(13/16)、100%(8/8),三组比较其差异无统计学意义(P>0.05)。在伴有淋巴结转移的患者癌组织中,三种蛋白的联合表达阳性率为87.50%(14/16),在无淋巴结转移的患者组织中,三种蛋白的联合表达阳性率为73.91%(17/23),两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。在23例肿瘤浸润百分比≥67%的患者组织中,三种蛋白的联合表达阳性率为91.30%(21/23)；在16例肿瘤浸润深度百分比<67%的患者组织中,三种蛋白的联合表达阳性率为62.50%(10/16),两组比较其阳性率的差异有统计学意义(P<0.05),三种蛋白的联合表达与肿瘤的浸润深度呈正比关系(r=0.331,P=0.028)。5.在宫颈鳞癌组织中,Annexin A2蛋白与CD147蛋白的表达呈正相关(r=0.405,P=0.006);Annexin A2蛋白与MMP-2蛋白的表达呈正相关(r=0.586,P=0.000)；CD147蛋白和MMP-2蛋白的表达呈正相关(r=0.488,P=0.000)。结论：1. Annexin A2、CD147和MMP-2蛋白可能参与宫颈鳞癌的发生过程。2. Annexin A2、CD147、MMP-2蛋白的高表达与宫颈鳞癌的浸润有关,MMP-2蛋白还可能参与了宫颈鳞癌的淋巴结转移过程。3. Annexin A2、CD147、MMP-2蛋白在宫颈鳞癌中均呈现正相关关系,三者的联合表达与肿瘤浸润深度密切相关,提示以上三者可能在宫颈鳞癌的浸润中起协同作用。