肺炎克雷伯杆菌(Klebsiella pneumoniae, Kp )是医院获得性感染(hospital-acquired infections)常见的重要革兰氏阴性肠杆菌科细菌。Kp感染可很快造成部分患者肺部结构的改变和播散性感染并产生严重的后遗症。为了更好的预防和控制这一严重危害患者生命健康的疾病,对于Kp毒力的研究一直是人们关注的焦点。magA基因是新发现的Kp毒力基因,已证明其与Kp感染的侵袭性和播散性密切相关,并作为高致病性Kp感染的筛选标志之一,但具体致病机制不清。目前我国大陆地区尚未见magA~+Kp感染,也无其感染患者临床资料分析的报道。目的:研究我国有无magA阳性肺炎克雷伯菌株分布及其分布情况。回顾性分析magA~+Kp感染患者临床特点和易感因素,为临床肺炎克雷伯感染的诊疗提供参考,并建立临床magA~+肺炎克雷伯菌株感染的快速分子诊断方法。方法:分离鉴定上海长海医院、解放军第八五医院2006年7月到2007年1月的临床致病性Kp菌株,提取菌株基因组DNA,采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction PCR)技术,对其进行magA基因的筛查,阳性对照为NTHU-K2044基因组DNA(由台湾国立大学Wang教授惠赠)。收集所有相应Kp感染患者的临床资料,包括:一般情况、感染部位、感染部位数、感染严重程度、血常规指标、治疗用药、治疗时间、有无播散、耐药情况和预后复发等临床数据。分析magA~+Kp菌株感染的特征,比对阴性和阳性两组菌株的差异性;分析各种临床资料与magA~+Kp感染的关系和magA~+Kp感染的易感因素。统计方法:计量资料描述以均数加减标准差表示(X±D):正态资料资料两组比较用t检验,如年龄;非正态资料采用Wilcoxon秩和检验方法,如抗生素治疗时间、白细胞计数、中性粒细胞百分比。二分类计数资料两组比较用精确概率计算,多分类计数资料两组比较用CMH检验(Cochran-mantel-haenszel statistic),如:性别、所在科室、原发疾病、样本、原发感染部位、主要感染症状、治疗抗生素、预后、是否复发、合并症、感染严重程度、耐药情况。magA阳性Kp感染与年龄、性别、严重程度、合并症、抗生素治疗时间等易感因素之间的分析采用Logistic逐步回归分析。以EXCEL建立数据库,采用SAS 8.2统计软件进行统计学分析,检验水准定为P<0.05有显著性差异。结果:共收集215例Kp感染患者的致病性Kp菌株和临床资料,通过PCR筛选临床Kp菌株的magA基因,在我国上海地区发现了magA~+Kp菌株的存在,其阳性率约为13.8%,高于文献报道全球标准菌株magA的阳性率7.8%;magA基因和肝脓肿的发生密切相关(3/0)。magA~+Kp菌株感染患者男女比例为25/5,平均年龄56.91±19.69,多继发于消化系统疾病(43.33%),常见的原发感染部位是呼吸道(43.33%),主要合并症是浆膜腔积液(20%)。magA~+Kp感染患者和阴性组比较:感染程度较重(P<0.0001)、易出现播散性感染(P<0.0001)、平均治疗时间延长(22.73±14.64 / 10.63±8.67, P<0.0001)、感染易复发(P=0.0029)。抗生素治疗上无明显差异。易感因素的回归分析结果:合并其他细菌感染(P=0.0255)、抗生素治疗时间(P<0.0001)和继发感染部位数(P=0.0002)与magA~+Kp感染的发生密切相关,是magA~+Kp感染发生的危险因素。提示:在长时间抗生素治疗其它细菌感染后,新出现多个部位的Kp感染,需注意是否为magA~+Kp感染本试验中magA基因与Kp的耐药性未见明显差异性;病例呈高度散发趋势。结论:magA基因PCR筛选结果证实我国大陆地区存在magA阳性Kp菌株;magA基因和肝脓肿发生密切相关;magA~+Kp菌株感染患者感染程度较重,所需抗生素治疗时间较长,更易播散性感染和复发;magA基因与Kp的耐药性之间无明显相关性,其感染病例呈高度散发趋势;PCR筛选可作为临床magA基因快速筛查的手段之一。