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磁性纳米颗粒因其生物相容性、特殊的磁性能使其在生物医学领域具有广阔的应用前景,如靶向药物、磁性细胞分离、核磁共振造影成像、磁热疗、固定化酶、DNA和RNA的纯化等。基于这些应用的目的,磁性粒子必须具有良好的生物相容性,流体的稳定性、高的比饱和磁化强度、表面丰富的活性功能基团。另一方面,导向肽作为一种靶向分子在肿瘤的治疗方面取得了重要的进展。过去十年,研究人员已经利用噬菌体展示技术成功的筛选出了对肿瘤细胞具有极强特异亲和性的导向肽。通过物理吸附或化学键合的方法可实现抗体、蛋白质以及靶向配位体与磁性纳米颗粒联结,从而使其具有靶向特异性。本工作以磁流体和导向肽为基本单元,研究制备了一种新颖的双功能(磁导向和生物导向)的纳米颗粒,并获得了如下结果: 1 以化学共沉淀法合成出磁性Fe3O4纳米颗粒,研究了磁性纳米颗粒在磷酸盐缓冲溶液中对绿色荧光蛋白标记的导向肽(A54-GFP)的吸附行为。Langmuir方程拟合的吸附等温线结果表明荧光蛋白标记的导向肽A54-GFP和经碳二亚胺活化的A54-GFP在磁性纳米颗粒表面的吸附均以单分子层为主,红外光谱证实了A54-GFP分子在磁性纳米颗粒表面的吸附结合;A54-GFP在磁性纳米颗粒的吸附通过氢键实现,经碳二亚胺活化后,A54-GFP分子主要以共价键的形式吸附结合在磁性纳米颗粒表面。磁性测试表明Fe3O4纳米颗粒的比饱和磁化强度达到61emu/g。体外靶向实验结果表明,表面结合导向肽A54-GFP的磁性纳米颗粒对相应的靶细胞具有特异亲和性。 2 采用原位化学共沉淀法制备出淀粉稳定的水基磁流体。磁流体中单个的Fe3O4-starch复合颗粒多数由淀粉包裹的几个Fe3O4晶粒组成,其粒径在40~50nm之间,平均水合直径为46nm。TEM分析表明,复合颗粒的核心Fe3O4主要为球形结构,粒子的单分散性良好,平均粒径为8nm左右。Fe3O4-starch复合颗粒在水相中具有良好的分散稳定性。通过高碘酸盐氧化的方法在复合颗粒的表面引入了醛基,并通过Schiff碱反应,将荧光素标记的对人肝癌BEL-7402细胞具有特异亲和性的导向肽FAM-A54成功的偶联结合在复合纳米颗粒上,从而制备得到了双功能的纳米颗粒。磁性能测试表明Fe3O4-starch复合颗粒比饱和磁化强度达到45emu/g,趋近于超顺磁性,双功能的纳米颗粒在外磁场的作用下具有良好的磁响应性能。 3 双功能纳米颗粒的体外细胞亲和实验表明,荧光素标记的导向肽FAM-A54与磁性纳米颗粒偶联后对相应的肿瘤细胞仍具有特异亲和性。体内靶向结果表明,磁流体进入生物体内,主要分布于肝脏组织和脾脏组织。在磁导向