CD44不同剪接体在喉鳞癌中的表达与临床意义

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目的:探讨CD44不同剪接体在喉癌组织、癌旁正常组织和喉癌细胞株Hep-2中的表达情况及其与喉癌各临床病理因素的关系及临床意义,研究其在喉癌中的诊断价值。方法:收集38例临床分期为Ⅰ~Ⅳ期喉癌组织及癌旁正常组织(距离癌缘大于0.5cm)并分为2组。培养人喉癌细胞株Hep-2并作为对照组。应用逆转录多聚酶链式反应RT-PCR分析CD44不同剪接体在喉癌组织,癌旁正常组织及人体喉癌细胞株Hep-2中的表达。在CD44组成型外显子5和组成型外显子16中两端处设计特异性引物,以喉癌组织、癌旁正常组织及人喉癌细胞株Hep-2为模板进行RT- PCR扩增,产物纯化,然后测序。应用生物信息学对克隆产物进行分析。结果:克隆的CD44有125bp,没有一个完整的阅读框,它是标准型CD44(standard form CD44,CD44s)。喉癌组织中CD44s高表达率为89.5%,人体喉癌细胞株Hep-2高表达率为83.3%,明显高于癌旁正常组织(26.3%),其差异均有显著统计学意义(P<0.05);喉癌组织中低分化鳞癌CD44表达率为(100%),明显高于高分化鳞癌(84.2%),其差异均有显著统计学意义(P<0.05),有颈淋巴结转移的喉癌组织CD44s表达率(100%)明显高于无颈淋巴结转移的喉癌组织(83.3) (P<0.05);吸烟患者CD44s的表达率(96.8%)明显高于不吸烟患者(57.1%) (P< 0.05);Ⅲ-Ⅳ期喉癌病变组织CD44s表达率(100%)明显高于Ⅰ-Ⅱ期(80%) (P<0.05);喉癌组织和人喉癌细胞株Hep-2中CD44s mRNA相对表达量明显高于癌旁正常组织(0.5366±0.2347 vs 0.2340±0.1615,P<0.05;0.5081±0.2184 vs 0.2340±0.1615,P<0.05),有淋巴结转移的喉癌组织CD44s mRNA相对表达量明显高于无淋巴结转移的喉癌组织(0.5992±0.2286 vs 0.3866±0.1815,P<0.05),吸烟患者的喉癌组织CD44s mRNA相对表达量明显高于不吸烟患者的喉癌组织(0.5297±0.2241 vs 0.3710±0.1669,P<0.05),TNMⅢ,Ⅳ期的喉癌组织CD44s mRNA相对表达量明显高于Ⅰ,Ⅱ期(0.5699±0.2346 vs 0.3145±0.2359,P<0.05)。CD44s mRNA表达与喉癌淋巴结转移、是否吸烟、临床分期和病理学分级相关,但与患者性别,肿瘤部位等临床病理因素无关(P>0.05)。结论: CD44s在喉癌组织中过度表达,CD44s在一定程度上参与了肿瘤的发生发展,是预后因子之一。CD44s的过度表达与喉癌淋巴结转移、是否吸烟、临床分期和病理学分级相关,在喉鳞状细胞癌中CD44s的高表达可以作为临床预测颈部淋巴结转移趋势和估计预后的主要参考指标之一,它表明颈清扫等综合治疗应该被采用。对CD44s的检测不仅能预测患者的预后,而且能够为肿瘤的个体化治疗提供信息,CD44s在喉癌病期进展和转移潜能方面也起重要作用,也可作为喉癌的一个生物学指标。
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