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目的: 1、观察人体CIK细胞的体外增殖力及杀伤乳腺癌细胞活性,并比较其培养体系中各组分对乳腺癌细胞的杀伤活性,以确定CIK细胞是否优于LAK细胞。 2、观察抗HER-2/neu单克隆抗体Hercetpin对HER-2过度表达乳腺癌细胞体外增殖作用的影响,探讨其在乳腺癌生物治疗中潜在的应用价值。 3、评价Herceptin与CIK细胞联用是否存在协同抗乳腺癌细胞作用,开辟乳腺癌生物治疗的新途径。 方法: 1、用细胞培养加细胞因子的方法,在体外诱导并扩增免疫效应细胞,应用流式细胞仪测定其表型。 2、应用MTT法检测Herceptin单独或联合CIK细胞、不同效应细胞(CIK细胞+LAK细胞)以及培养体系中不同组分的体外细胞毒性。 3、采用低浓度Herceptin+适中效靶比CIK细胞(对照组不加Herceptin)、适中浓度Herceptin+低效靶比CIK细胞(对照组不加CIK细胞)抗乳腺癌细胞,其结果分别与各自对照组相比确定有无协同效应。 结果: 1、在培养过程中,CIK细胞CD3+、CD56+双阳性细胞获得大量增殖,而LAK细胞增殖不明显。CIK细胞的体外细胞毒性显著优于LAK细胞(P<0.05)。CIK细胞培养体系中各组分杀瘤活性比较:CIK细胞+上清组95.78±5.16%,CIK细胞组单独55.42±3.13%,上清组27.65±2.08%。 2、Herceptin对SKBR3、MDA-MB-453细胞有显著抑制作用,浓度为5μg/ml时,对SKBR3、MDA-MB-453的抑制率分别为26.19±1.31%和13.00±0.96%;在抗体浓度为80μg/ml,抑制率分别为50.12±3.16%和32t2.63%;而对MCF.7细胞生长无明显影响。 3、HercCptin与CIK细胞联合抗乳腺癌效果显著高于单独作用,经2.SPg/ml Herceptin作用92小时后,再经CIK细胞(E:T二10 且)作用4小时抑瘤率比单独 CIK细胞增加 32%,经 80pg/thl0Ccytill与 CIK细胞(E:T二l:l)联用比单独 Herc印tin增力了 18%。 结论: l、CIK细胞是一种具有高度增殖能力、高度细胞毒性的新型免疫活性淋巴细胞。CIK细胞培养体系中,上清有一定的杀瘤活性,可协同CIK细胞作用。 LHerceptin可显著抑制HER工/neu受体高表达乳腺癌细胞的增殖,与CIK细胞联用具有协同效应,在乳腺癌治疗中具有潜在应用价值。