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目的:探讨叶酰聚谷氨酸合成酶(FPGS)在氨甲蝶呤(MTX)对映体(L-(+)-MTX和D-(-)–MTX)耐药A549细胞株中的表达,并应用于临床病例。方法:用SYBR Green I为荧光染料,以β-actin作参照,建立检测FPGS mRNA的实时荧光定量PCR方法;根据循环阈值(Ct值)、标准曲线相关系数、斜率、重复性曲线、熔解曲线、扩增效率曲线等进行方法学评价;并用该方法检测MTX对映体耐药细胞株及应用MTX耐药的白血病骨髓细胞中FPGS基因表达;用蛋白免疫印迹方法测定肺癌A54