SGK1在鼻咽癌中的表达及其对鼻咽癌细胞生物学的影响

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目的:鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma,NPC)是一种具有区域性分布以及种族聚集性特征的头颈部恶性肿瘤,好发于我国南方及东南亚地区。鼻咽癌发生于鼻咽部粘膜,其病理类型多为低分化鳞状细胞癌,恶性程度较高,早期即可出现颈部淋巴结转移。鼻咽癌大多对放疗有中度敏感性,以适形调强放疗为主的综合治疗极大地提高了鼻咽癌的局部控制率,却未能显著降低其远处转移率,治疗失败的主要原因是局部复发和远处转移。因此,深入研究鼻咽癌的发生与发展机制,对改善鼻咽癌治疗效果、提高患者生存率有重大意义。血清和糖皮质激素诱导激酶1(SGK1)属于丝氨酸/苏氨酸激酶家族,受血清和糖皮质激素转录刺激。胰岛素和生长因子通过PI3K、3-磷酸肌醇依赖激酶1(PDK1)或mTORC-2复合物诱导SGK1的表达。在哺乳动物中,SGK1在所有被检查的组织中都有表达,并调节着各种各样的细胞分子,包括细胞增殖转移和凋亡、离子通道等。但SGK1与鼻咽癌的相关性研究目前国内外尚未见报道。本文旨在研究SGK1在鼻咽癌组织中的表达情况,以及SGK1对鼻咽癌细胞生物学特性的影响,探讨SGK1表达与鼻咽癌发生发展的关系。方法:1.免疫组化法检测SGK1在21例鼻咽癌组织和13例慢性鼻咽炎症组织中的蛋白表达,卡方检验来比较SGK1在鼻咽癌组织和慢性鼻咽炎组织中表达的差异。2.Lipofectamine 2000瞬时转染鼻咽癌细胞,转染24小时在荧光显微镜下确认转染成功后,再培养24小时行Western blot检测转染后鼻咽癌细胞中SGK1的表达情况,选取SGK1沉默效果最显著的siRNA,构建沉默SGK1的鼻咽癌细胞。3.细胞生物学功能试验:CCK8法检测沉默SGK1后鼻咽癌细胞的增殖能力,流式细胞术检测其凋亡水平,Transwell迁移试验检测其迁移能力,存活率、凋亡率、Transwell迁移试验均采用单因素的方差分析进行组间比较。结果:1.免疫组化结果表明:SGK1的蛋白表达主要见于细胞质,在21例鼻咽癌组织中,SGK1蛋白的阳性表达率为76.19%,在13例慢性鼻咽炎组织中,SGK1蛋白的阳性表达率为15.38%,两组差异具有统计学意义(P<0.01)。2.成功构建了沉默SGK1的鼻咽癌细胞HNE-1/siSGK1,证实了SGK1表达下调可明显抑制鼻咽癌细胞的体外增殖、存活、迁移能力,并促进其凋亡水平。结论:1.SGK1在鼻咽癌组织和慢性鼻咽炎组织的表达有明显差异,鼻咽癌组织中呈高表达。2.沉默鼻咽癌细胞中SGK1的表达,明显抑制了鼻咽癌细胞增殖和迁移促进了凋亡。
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