胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定与免疫防制

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从某猪场死亡猪严重出血的肺脏、肝脏、脾脏和胸腔渗出液中分离到1株具有多形性的革兰氏阴性球杆菌,为两极着色,其大小为0.7~1.6×0.2~0.5μm,单在、成双、成短链或成团状。该菌不能在普通营养琼脂、普通肉汤和麦康凯培养基上生长。在绵羊血琼脂平板上生长18~24h,形成不透明的淡灰色、湿润、光滑、表面稍隆起的菌落,呈明显的β溶血。CAMP试验可发现金黄色葡萄球菌周围的溶血带明显增宽。生长需要V因子,发酵糖类,产酸不产气,不能发酵乳糖、木糖和山梨醇,硝酸盐还原试验和尿素酶试验均呈阳性,不产生H2S和靛基质,接触酶、氧化酶、VP和MR试验均呈阴性。血斜面培养物4℃可保存15d左右,脱脂牛乳中—40℃可保存6个月左右。动物感染试验表明,分离菌有强致病性,含菌量3×108~4×109个/mL的肉汤培养物腹腔注射,可使小白鼠在感染后6~10h死亡,也可使豚鼠发病。用分离菌肉汤培养物通过胸腔、腹腔、肌肉、耳静脉和滴鼻五种途径感染35日龄左右的仔猪,均可不同程度地引起仔猪发病或死亡。其中通过胸腔感染的仔猪发病较快,症状及病变也较为典型。发病仔猪表现为咳嗽,喷嚏,呼吸极度困难,严重的呈犬坐呼吸,若继发其他细菌感染,则症状加剧,有的仔猪表现为走路不稳。剖检可发现胸腔有大量的渗出液,心包增厚,与胸膜或肺脏黏连;肺脏萎缩,表面有灰白色或暗红色的坏死灶或淤血斑,切面支气管内有泡沫状液体流出;肝脏、肾脏肿大,表面有坏死灶,被膜紧张。气管内侧黏膜肿胀,消化系统无明显病变。病理组织学观察,可见肺泡内有少量的浆液,肺间质有坏死,肺脏静脉血管扩张充血;肝脏、肾脏均有不同程度的变性、坏死,静脉血管扩张充血。可从死亡仔猪的病变组织中分离到感染菌。结合生物学特性和动物致病试验,可将该分离菌鉴定为胸膜肺炎放线杆菌。 该分离菌对大多数常用的抗生素不敏感。按常规方法将分离菌制成油佐剂灭活苗(6×1011~8×1011个/mL)免疫仔猪和母猪,均可产生不同程度的保护作用,抗体检测可达27以上,攻毒试验证明被免疫的仔猪不发病而未免疫的仔猪发病。
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