我国有丰富的中草药资源和微生物资源,以它们为研究材料,提取、分离纯化活性多糖,继而研究其理化性质及单糖组成,一方面为进一步研究多糖的化学结构、构效关系及结构对于其生物活性的影响提供良好的基础,另一方面也可以推动糖化学的发展。　　本文建立了高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法测定糖含量的方法，并应用于天麻、南瓜、大蒜中果糖、葡萄糖及蔗糖含量的测定；从中药甘草中分离得到甘草多糖(GP),并用HPLC-ELSD法测定了其单糖组成;采用优化的实验条件从中药大黄中提取了大黄多糖(RP),用气相色谱(GC)测定了其单糖组成;利用深层发酵提取纯化得到了白灵菇菌丝体多糖(PNMP)和白灵菇胞外多糖(PNEP),对这几种多糖的理化性质进行了研究,利用GC测定了其单糖组成。　　1. HPLC-ELSD法测定天麻、南瓜、大蒜中果糖、葡萄糖及蔗糖含量　　建立了HPLC-ELSD法测定天麻、南瓜、大蒜中果糖、葡萄糖及蔗糖含量的方法。样品经热水提取后,采用Kromasil NH2(250 mm×4.6 mm,5μm)柱分离,以乙腈-水(80:20, V/V)为流动相,使用ELSD检测。结果表明该方法操作简便、快速、准确,用于实际样品的测定结果令人满意。　　2.甘草多糖的分离纯化及单糖组成分析　　从中药甘草中提取、分离纯化出一种 GP。首先在单因素分析(提取温度、提取时间、料液比、提取次数)的基础上进行L9(34)正交分析,优化提取条件,正交实验表明,GP提取的优化条件为:温度为90℃,提取时间为4 h,液固比为40:1,提取次数为3次。其次,在多糖的分离纯化中,探讨了Sevag法、冻融法和三氯乙酸法对GP粗提物进行除蛋白处理的效果,结果表明,综合考虑蛋白去除率、多糖损失率等因素,Sevag法优于冻融法和三氯乙酸法,是适用于GP脱除蛋白的有效方法。将GP依次通过Sevag法除蛋白,H2O2脱色后上Toyopearl HW-55F凝胶柱纯化得到一单组分,Toyopearl HW-50F凝胶柱鉴定其纯度。最后,通过紫外光谱(UV)、红外光谱(IR)等仪器分析其性质,并由HPLC-ELSD法测定了GP的单糖组成,得出GP是一种葡聚糖,这与IR分析结果相吻合。　　3.大黄多糖的分离纯化及单糖组成分析　　建立了一种提取、分离纯化RP的方法。首先优化了提取条件,正交实验表明, RP提取的优化条件为:温度为90℃,液固比为40:1,提取时间为4 h,提取次数为2次。其次,将粗多糖依次通过脱蛋白、除色素后上Toyopearl HW-55F凝胶柱纯化得到一单组分,Toyopearl HW-50F凝胶柱鉴定其纯度。最后,通过UV、IR等仪器及化学方法分析其理化性质,用GC测定其单糖组成。实验结果表明,RP中含有糖醛酸,不含蛋白和核酸;IR图谱分析显示其具有多糖的特征吸收峰,以β-型糖苷键连接为主;GC分析其单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,物质的量之比为:23.56:157.12:17.85:1.00:67.54:58.35。　　4.白灵菇深层发酵多糖的分离纯化及单糖组成分析　　对白灵菇菌丝体和发酵液中的多糖进行了初步的分离纯化及单糖组成分析。经深层发酵培养获得白灵菇菌丝体和发酵液,并从中提取得到PNMP和PNEP;样品经脱蛋白、除色素后上Toyopearl HW-55F凝胶柱,PNMP分离得到两个单一组分PNMPⅠ、PNMPⅡ,经 Toyopearl HW-50F凝胶层析柱鉴定其组分均相对单一,PNEP经Toyopearl HW-55F凝胶柱纯化得到一单组分,Toyopearl HW-50F凝胶柱鉴定其纯度。最后,通过UV、IR等仪器及化学方法分析了其理化性质,GC测定其单糖组成。实验证明,PNMPⅠ、PNEP中有糖醛酸的存在,PNMPⅡ为含有糖醛酸的蛋白多糖;经IR图谱分析,三者均有多糖的特征吸收峰,除此之外,PNMPⅠ中含有а-D-吡喃葡萄糖,PNMPⅡ中含有D-吡喃葡萄糖,PNEP中含有β-D-吡喃葡萄糖,且三者都具有吡喃环碳骨架等复杂的结构;GC测得PNMPⅠ、PNMPⅡ和PNEP均是由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖及一种未知组分构成的杂多糖,三种多糖的区别是其单糖物质的量之比不同。