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凋亡诱导因子AIF(apoptosis inducing factor)由Kroemer等人在1996年发现并命名。当用caspase广谱抑制剂z-vad.fmk处理细胞时,AIF能参与caspase非依赖细胞凋亡途径,促进细胞凋亡。除了能诱导细胞凋亡外,AIF还对线粒体形态完整、能量代谢稳态及氧化应激具有重要调控作用。 非受体酪氨酸激酶c-Abl由人9号染色体的c-abl基因编码,属于Src非受体酪氨酸激酶家族重要成员。在细胞中,c-Abl蛋白能调控多种生命活动,如细胞增殖、细胞粘附、DNA损伤修复、氧化应激及细胞凋亡等。在氧化应激状态下,c-Abl可聚集到线粒体上并介导线粒体功能损伤及细胞凋亡。然而,目前c-Abl通过线粒体调控胞内氧化应激的分子机制尚未明确。 实验室前期研究表明,非受体酪氨酸激酶c-Abl能够与凋亡诱导因子AIF相互作用。抗p-Tyr抗体的Western Blot实验表明,c-Abl和Arg能使AIF发生酪氨酸磷酸化。本研究通过一系列细胞免疫荧光染色、免疫沉淀、免疫印迹实验证明,c-Abl特异性抑制剂STI571可诱导AIF亚细胞分布改变,干扰AIF前体进入线粒体,使细胞内线粒体膜电位下降,最终导致ROS(reactive oxidative species)水平升高,线粒体发生片段化及自噬。该现象能被具有线粒体锚定功能的COX-AIF缓解。进一步研究表明,c-Abl能使AIF前体发生酪氨酸磷酸化,且磷酸化位点很可能位于AIF1-120 a.a的线粒体定位信号区域。同时,我们还发现c-Abl通过促进Parkin与AIF相互作用增强 Parkin对AIF泛素化的抑制作用,抑制AIF被蛋白酶体降解。因此我们认为,c-Abl一方面通过磷酸化AIF前体促进其胞质-线粒体转运过程以维持线粒体形态及功能完整,另一方面,它可通过促进Parkin与AIF相互作用抑制AIF被蛋白酶体降解,增强AIF蛋白的稳定性。 本研究首次证实了c-Abl激酶可通过凋亡诱导因子AIF调控线粒体形态及功能,并阐明了c-Abl通过促进AIF前体酪氨酸磷酸化及影响其胞质-线粒体转运过程调控线粒体生理功能。线粒体对细胞生命活动具有重要调节作用,因此本研究对深入认识Abl酪氨酸激酶家族对线粒体功能及胞内氧化水平的调节作用具有重要意义。