赣南地区耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌血清分型、毒力及分子机制研究

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目的:1、研究高毒力、高耐药性肺炎克雷伯菌的微生物学特征。2、研究赣南地区高毒力、耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌血清分型。3、研究赣南地区高毒力、耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的分子机制。4、研究赣南地区的高毒力、耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的毒力特征。方法:1、菌株来源:收集2年来赣南地区六家医院分离的碳青霉烯类肺炎克雷伯菌株,总结赣南地区耐碳青霉烯KP(Klebsiella pneumoniae,KP)的血清型种类。2、收集上述菌种进行血清分型:收集2016年1月至2018年12月赣南地区六家医院的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌,采用PCR法确定血清荚膜分型,选取最多的分型调查患者的情况。3、收集已分型菌株用脉冲场凝胶电泳(PEGE)等实验,进行毒力因素分析:确定肺炎克雷伯菌主要分型之后,对筛选出来的荚膜血清型菌株进行多位点序列分析和脉冲场凝胶电泳分析,采用PCR法确定毒力基因,研究毒力基因是否在传播;抗中性粒细胞吞噬实验、血清抗性实验、生物膜形成实验等,评估不同血清分型菌株的毒力。4、通过参考文献、通过耐药基因的检测,分析所得菌株的分子机制:查阅参考文献研究,研究产生耐药机制可能的原因。结果:1、赣州地区耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌主要的血清分型以K2/K1/K57为主,其中K2最为广泛,约占20%。2、赣南地区收集到的肺炎克雷伯菌,拉丝试验结果仅3株阳性,阴性率达96.25%。3、感染耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的人群,表现出了住院时间比较长,免疫力低下等这样的共性。4、80株耐碳青霉烯类抗生素的肺炎克雷伯菌,都是来自赣南地区的菌种,其中血清抗性阳性的占20%。5、中性粒细胞的吞噬作用,对实验中的所有菌株,吞噬能力都不是很明显。6、80株实验菌株中,耐药基因blaKPC-2、blaSHV-12较为多见;耐药机制最广泛认可的原因,可能是对于碳青霉烯类的抗生素的耐药,都是源自于含有KPC位点基因。结论:1、血清分型与文献报道类似,赣南地区出现几率最高为K2型。2、耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌之间已经存在一定的毒力基因遗传现象。
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