鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类和碳青霉烯类抗生素耐药分子特征研究

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不动杆菌属是一类非发酵糖革兰氏阴性杆菌,是近年来引起院内感染高发病率和死亡率的重要原因。目前该菌属至少包含33个不同的基因型,其中以鲍曼不动杆菌临床分离率最高,该菌可引起包括呼吸机相关性肺炎、皮肤和软组织感染、伤口感染、继发性脑膜炎、血行感染等各种感染。鲍曼不动杆菌、醋酸钙不动杆菌、不动杆菌基因型3和不动杆菌基因型13TU四者间生化特性十分相近,表型鉴定方法难以区分。氨基糖苷类及碳青霉烯类抗生素因其广谱、高效的特点,常用于临床治疗鲍曼不动杆菌感染。近年来,鲍曼不动杆菌耐药状况日益严峻,多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB)、泛耐药鲍曼不动杆菌(XDRAB)、全耐药鲍曼不动杆菌(PDRAB)等的广泛传播,受到各界关注。本研究着手于鲍曼不动杆菌菌种精确鉴定、药敏分析和耐药性分子特征三方面,对2006~2009年北京地区232株临床分离菌株进行研究。通过VITEK2全自动分析仪及16S rRNA序列分析法,对临床分离株进行菌种鉴定;对确证的鲍曼不动杆菌运用VITEK2全自动微生物分析仪、琼脂二倍稀释法和肉汤微稀释法,考察其药敏分布情况,并对VITEK2药敏结果进行误差分析;在鲍曼不动杆菌中检测22种氨基糖苷类耐药基因(aac(3)-Ⅰ, aac(3)-Ⅱc, aac(6’)-Ⅰb, aac(6’)-Ⅱ, aph(2")-Ⅰb, aph(2")-Ⅰc, aph(2")-Ⅰd, aph(3’)-Ⅰ, aph(3’)-Ⅱb, aph(3’)-Ⅲa, aph(3’)-Ⅵa, aph(4)-Ⅰa, ant(2")-Ⅰa, ant(3")-Ⅰ, ant(4’)-Ⅰa, armA, rmtA, rmtB, rmtC, rmtD, rmtE, npmA)及15种碳青霉烯类耐药基因(blaKPC,blaGES, blaTEM, blaSHV, blaCTX-M-1.3.10-12.15, blaIMP-1.4.5.6.9.10.18, blaIMP-2.8.13.19.20, blaVIM-1.2.4.5, blaVIM-2,6,8-11, blaSIM-1, blaNDM-1, blaOXA-23-like, blaOXA-24-like, blaOXA-51-like,确耐药基因分布情况;使用SPSS13.0软件分析耐药基因与耐药表型间的相关性。研究结果表明,受试菌中173株为鲍曼不动杆菌;除左氧氟沙星、氨苄西林/舒巴坦和3种碳青霉烯类抗生素(亚胺培南、厄他培南、美罗培南)外,鲍曼不动杆菌对其余17种抗生素的耐药率均>50%(59.54%-100%);VITEK2对阿米卡星药敏结果严重错误率最高(34.10%);鲍曼不动杆菌中高水平氨基糖苷类耐药(HLAR)表型检出率为58.96%,CR表型检出率为30.06%,MDR表型检出率为65.90%:HLAR鲍曼不动杆菌中,8种氨基糖苷类耐药基因被检出,其中armA检出率最高(98.04%),该基因与耐药表型相关性最高,一致性最好;CR鲍曼不动杆菌中,3种碳青霉烯类耐药基因被检出,其中blaOXA-51-like检出率最高(98.08%),blaOXA-23-like次之(92.31%),该blaOXA-23-like基因与耐药表型相关性最高,一致性最好。2006~2009年北京地区鲍曼不动杆菌为不动杆菌属临床分离株中主要菌种,鲍曼不动杆菌呈现高水平氨基糖苷类耐药现状,碳青霉烯类耐药率上升趋势明显,多重耐药菌株高分离率;VITEK2对阿米卡星药敏结果严重误差率高;多个耐药基因在鲍曼不动杆菌中流行,armA基因与HLAR表型、blaOXA-23-like基因与CR表型密切相关;发现1株未携带待检基因的耐药菌株,提示有新耐药基因或亚型存在。
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