近岸海域抗生素耐药基因分布规律及接合转移机制研究

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抗生素耐药基因(Antibiotic Resistance Genes, ARGs)作为一种新型污染物造成的健康危害已引起世界关注,前期研究表明ARGs广泛存在于各种环境介质中。海洋接纳了大量包括ARGs在内的污染物,且其远程运输能力可能会促进ARGs的扩散,但目前海洋ARGs污染的相关研究尚不充分。本论文拟研究近岸海域ARGs的分布特征,明确陆海交互过程中ARGs的丰度变化及潜在原因。主要内容及结论如下:
  (1)本论文在渤海湾近岸海域不同类型区域中设立了采样点,调查了常见ARGs及相应抗生素的浓度,得到了以下结论:排污口和海水养殖区的抗生素和ARGs含量都比较高,所有ARGs中检出率以及丰度最高的是磺胺类耐药基因(sul1与sul2的平均丰度分别为2.38×10-3/16Scopies及1.7×10-3/16Scopies),此外大环内酯类的ermB(平均丰度为6.63×10-4/16Scopies)和四环素类的tetM(平均丰度为3.07×10-4/16Scopies)的丰度也较高。int1及抗生素与ARGs均具有很强的相关性,表明近海环境中int1与抗生素可能会促进ARGs的传播扩散。
  (2)本论文设立了不同比例下的淡水/海水混合体系,定期提取DNA以观察ARGs和菌落结构的变化,向纯淡水体系中投加海盐以探讨盐度对陆源输入ARGs的影响,得到的结论如下:淡水/海水混合体系中不同ARGs随时间的变化规律有明显差别,但最终都能够趋于稳定,且淡水输入的ARGs丰度能够提高近海环境中相应耐药基因的丰度。盐度实验表明高盐度能够显著提高tetM的丰度。不同盐度条件下的混合体系中的菌落结构具有很大差异,纯海水和纯淡水体系中的优势菌种在混合体系中的丰度急剧下降,而混合体系中某些原本丰度较低的海水土著菌由于受到淡水中携带的微量元素的影响含量升高,这些细菌中包含耐药基因的潜在宿主菌,它们丰度的升高可能会导致近岸海域人体健康风险增加。
  (3)本论文设立了淡水菌/海水菌的接合转移体系以探讨ARGs在淡水菌和海水菌间接合转移的可能性,在此基础上分析了盐度对ARGs在淡水菌和海水菌间接合转移效率的影响,得到的主要结论如下:ARGs能够在海水菌和淡水菌间进行水平转移,而近海环境下的盐度并不能抑制该接合转移的效率,预示着近海排污活动造成的耐药基因风险可能比预想的要大;通过观察不同盐度条件下海水菌和淡水菌的生长曲线发现,盐度能够对淡水菌和海水菌的生长状况造成一定的影响。
  本论文的结论有助于更全面的了解ARGs在近海环境中的污染现状,明确ARGs从陆地向海洋传播扩散的规律,为ARGs污染的控制提供技术支持。
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