【摘 要】
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将玉米的转座子系统Ac/Ds导入水稻基因组中,诱导产生突变体,已经成为构建水稻插入突变体库的主要策略.该研究对Ds转化植株和Ac转化植株进行纯合体的筛选,并对T-DNA插入引起的
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将玉米的转座子系统Ac/Ds导入水稻基因组中,诱导产生突变体,已经成为构建水稻插入突变体库的主要策略.该研究对Ds转化植株和Ac转化植株进行纯合体的筛选,并对T-DNA插入引起的突变体进行鉴定;同时利用Ds纯合体和Ac纯合体杂交,构建水稻的Ac/Ds双因子转座系统,分析F<,1>~F<,4>代Ds转座的特性,并对由于Ds转座引起的表型变异进行鉴定,主要结果如下:1、在T<,6>代和T<,7>代,采用潮霉素抗性检测和Basta抗性检测相结合的方法对17个Ds尚未纯合的转化材料进行Ds纯合体的筛选,共有8份材料获得Ds转化纯合体,有5份材料只能获得了Ds转化杂合体.2、对T-DNA(Ds)转化群体中出现的4个突变体材料进行了遗传分析.3、以20个Ds纯合体材料为母本,以3个Ac纯合体材料为父本,构建了48个杂交组合,获得同时含Ds和Ac因子的F<,1>植株共837个,其中有156个F<,1>植株发生了体细胞的转座,转座频率为18.6%.在发生转座的F1植株衍生的F<,2>代中出现了10种基因型.4、在Ds×Ac组合的F4代筛选到1个黄化苗突变材料,绿苗和黄化苗的分离比率符合3:1,经PCR检测表明该突变是由转座的Ds插入引起的隐性突变.该研究利用Ds转化纯合体和Ac转化纯合体杂交,构建水稻的Ac/Ds双因子转座系统.利用PCR技术对Ds的转座行为进行了连续4代的跟踪检测,Ds在低世代发生的大多是体细胞转座,随着世代的提高,胚胎转座的频率大大提高.同时,筛选到1个Ds转座引起的黄化苗突变体,进一步证明了通过这一系统可以有效地产生Ds转座突变.根据该研究的结果,提出了Ac/Ds双因子系统中Ds转座的检测程序,为利用这一系统大规模构建Ds插入突变体库提供借鉴.
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