论文部分内容阅读
乙烯(C2H4)是五大类植物激素中结构最为简单的唯一的气态物质。它影响着植物生长发育的许多过程,同时也参与调节植物体对各种生物和非生物的刺激和胁迫的应答反应。由植物体的内部发育信号和外部生物与非生物刺激信号所组成的复杂调控网络,严格控制着乙烯的合成水平。它是由S-腺苷-L-甲硫氨酸(SAM)经由中间产物1-氨基环丙烷基-1-羧酸(ACC)生物合成的。从SAM生成ACC是这个途径的限速步骤,由ACC合成酶(ACS)催化完成。ACC合成酶是由多基因家族编码的,模式植物拟南芥(Arabidopsisthaliana)中有8个有催化合成ACC功能的ACC合成酶编码基因。
ACS基因的表达分别接受转录和转录后水平的调控,不同的ACS基因表达的调控方式也不相同。对ACS基因转录水平的研究结果表明:不同的发育、环境、激素等信号诱导植物体内不同组群的ACC合成酶基因表达。但是,不同ACS基因的表达也会相互重叠。
除了转录水平调节以外,转录后调控对ACS活性调节也具有非常重要的影响。拟南芥和番茄ACS同功酶家族C末端差别很大,这个结构域负责ACS的磷酸化和转录后调控。对拟南芥8个ACS功能基因的氨基酸序列最后一个保守域之后的C末端序列进行分析比较,发现根据C末端的长度和序列同源性,可以将它们分成三大组,其中以ACS7所代表的第三组,C末端非常短,其C末端序列中也不具有根据番茄ACS家族中LeACS2序列信息所推测的三肽磷酸化位点。蛋白抑制因子的负调控假说很可能并不适用于这一类ACS基因表达的转录后调控,或者,其调控的靶位点不同于ACS5。
为了进一步研究ACS基因表达的转录后调控机制,本课题在实验室前期工作基础上,完成了对GST与AtACS2、AtACS7和二者C末端互换的AtACS27融合基因的转基因拟南芥植株的分子鉴定,建立了在XVE诱导系统下诱导转基因拟南芥中三种融合基因过表达的诱导体系,并利用WesternBlotting方法证明,通过与AtACS7的C末端互换,可以提高转基因拟南芥中AtACS2的蛋白稳定性。