沃暖对大鼠脾胃虚寒证的逆转作用研究

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菊花,菊科植物菊(Chrysanthemum morifolium Ramat)的干燥头状花序,味甘、苦,微寒,具有散风清热、平肝明目的功效。《神农本草经》中记载:“久服利血气,轻身耐老延年”。菊花主要含有挥发油、黄酮、三萜和有机酸类等成分,具有抑菌、抗氧化、抗肿瘤和增加机体免疫力等药理作用。菊花作为药食同源植物,营养价值极高,《离骚》中亦有“朝饮木兰之堕雾兮,夕饮秋菊之落英”的说法。菊花茶气味独特,味道甘甜,具有疏风止痛、清肝明目等功效,深受人们的喜爱。然而,《本草汇言》中记载:“气虚胃寒,食少泄泻之病,宜少用之(菊花)”,脾胃虚寒证,是指脾胃阳气虚衰、阴寒内盛所表现的证候。我们研究发现给脾胃虚寒证大鼠灌胃菊花水煎剂14天后会加重大鼠的寒证,证明了脾胃虚寒者不宜饮用菊花。我们采用药食同源的干姜和陈皮组合物(沃暖)复配菊花,利用干姜温中散寒及陈皮理气宽胸、健脾和胃的作用来拮抗菊花寒凉之性,发挥温煦中焦的功效,以期起到逆转菊花对大鼠脾胃虚寒证的加重作用,使脾胃虚寒人群也能饮用菊花。干姜,陈皮和菊花提取物的制备:称取干姜、陈皮和菊花(1:1:1),加20倍蒸馏水浸泡30 min,武火煮沸,文火煎煮20 min,过滤,滤液浓缩,冷冻干燥,得到淡黄色细粉,气微辛香,味微辣,收率为25.92%。脾胃虚寒证大鼠模型的建立:采用寒邪客胃法建立脾胃虚寒证大鼠模型。将SD雄性大鼠随机分为空白组(8只)及脾胃虚寒造模组(48只)。给大鼠灌胃知母:石膏:黄柏:龙胆草1.5:2.0:1.0:1.2水煎剂(2.50g生药/mL),给药剂量为2 mL/100 g,每日一次,连续14天,然后,将造模大鼠随机分为模型组、菊花组(60 mg/100 g)、提取物低剂量组(80 mg/100 g)、提取物中剂量组(160 mg/100 g)、提取物高剂量组(320 mg/100 g)、阳性组,每组8只;空白组给予等剂量的蒸馏水,阳性组给予附子理中丸溶液(150 mg/100g),每日一次,连续14天。第15天,眼眶取血,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中胃泌素(GAS)、胃动素(MTL)、白介素2(IL-2)、白介素8(IL-8)及谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)水平;脱臼处死大鼠,取出脾脏和胃组织,称重计算大鼠脾脏指数、胃重指数;HE染色法观察脾脏组织和胃粘膜组织形态学及病理学变化。结果显示造模后大鼠体重减轻,进食量、饮水量下降,出现毛色脏乱无光泽,大便溏稀,精神萎靡不振等寒象;模型大鼠血清中胃泌素和胃动素含量下降,分别为63.42±1.06 pg/mL和123.16±1.14 pg/mL,与空白组78.65±4.64 pg/mL和166.40±9.12相比显著降低(P<0.05)、血清中IL-2和IL-8含量升高,分别为238.44±2.08 pg/mL和与153.45±0.42 pg/mL,与空白组205.41±4.81 pg/mL和101.60±0.40 pg/mL相比显著升高(P<0.05);脾脏指数为1.65±0.05 mg/g,与空白组3.45±0.37 mg/g相比有显著降低(P<0.01),胃重指数为6.50±0.18 mg/g,与空白组4.95±0.10 mg/g相比有显著升高(P<0.01);病理组织切片观察发现模型大鼠出现脾脏和胃粘膜组织损伤现象,如脾小体收缩、数量减少和胃粘膜结构不完整,粘膜下层充血、水肿现象明显,腺体数量减少且排列紊乱,伴有严重的炎症细胞浸润等。提取物中、高剂量均可逆转大鼠脾胃虚寒证,大鼠血清中胃泌素含量显著升高,分别为98.05±3.44 pg/mL和85.24±0.11 pg/mL,胃动素含量显著升高,分别为156.38±4.96 pg/mL和150.79±1.14 pg/mL,IL-2含量显著降低,分别为205.36±1.86 pg/mL和200.68±1.35 pg/mL,IL-8含量显著降低,分别为91.25±4.64 pg/mL和98.84±5.84 pg/mL;提取物中剂量能显著提高脾脏指数(2.64±0.34 mg/g),显著降低胃重指数(4.76±0.14 mg/g);病理组织切片观察发现提取物中、高剂量对脾胃虚寒证大鼠的脾脏和胃粘膜损伤具有保护作用。综上所述,沃暖能通过上调血清中胃泌素、胃动素水平,下调IL-2、IL-8的水平,保护大鼠脾脏和胃粘膜组织而起到逆转大鼠脾胃虚寒证的作用,沃暖配伍菊花后,缓解了菊花的寒凉之性,为脾胃虚寒人群饮用菊花提供了实验依据。
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