【摘 要】
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本研究为2004年河南省重大科技攻关计划项目“中药饮片加工炮制规范化研究”的子课题“山茱萸饮片加工炮制规范化研究”的一部分。主要是对山茱萸的临床常用饮片规格山萸肉、
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本研究为2004年河南省重大科技攻关计划项目“中药饮片加工炮制规范化研究”的子课题“山茱萸饮片加工炮制规范化研究”的一部分。主要是对山茱萸的临床常用饮片规格山萸肉、酒萸肉的紫外谱线组、高效液相指纹图谱进行研究,以及血清化学的初步研究。内容分为二大部分:山萸肉、酒萸肉饮片指纹图谱的建立与比较、山茱萸炮制前后血清化学的初步研究。
目的:建立不同方法制山茱萸饮片紫外谱线组以及高效液相指纹图谱,比较山茱萸炮制前后紫外图谱最大吸收的变化;同时对山茱萸HPLC指纹图谱进行相似度分析,比较山茱萸炮制前后指纹图谱的变化,为山茱萸的规范化炮制奠定基础;对山茱萸炮制前后含药血清变化进行初步研究,以期为以后山茱萸有效成份的研究进行初步探讨。
方法:通过系统查阅国内外文献资料,对山茱萸在我省的药源分布、化学成份、药理作用进行归纳总结,建立系统的化学成分研究方法:1、以紫外分光光度计测定山茱萸不同炮制品粉末的蒸馏水、无水乙醇、氯仿以及石油醚不同溶剂浸提液的紫外吸收,比较最大吸收波长,并通过同波长、同浓度的最大吸收峰的高低来比较其有效成分相对含量;采用HPLC法对不同方法制酒萸肉饮片以及山茱萸饮片的高效液相指纹图谱并对其进行比较:过指纹图谱处理软件(Chromafinger 2005 beta 0.1软件)对山茱萸指纹图谱进行相似度分析。2、将山萸肉炮制前后的样品水煎液给大鼠灌胃,对含药血清与空白血清的HPLC指纹图谱进行初步比较。
结果:1、山茱萸不同炮制品同种浸提液的最大紫外吸收处的波长不同,而且同种炮制品的不同浸提液的最大紫外吸收处的波长也不同。常压下酒蒸山茱萸最大紫外吸收处的吸收度最大,其次是加压酒蒸,再次是生品;通过对山茱萸HPLC指纹图谱进行相似度分析表明:不同产地、不同批次、同一炮制方法和工艺的山茱萸饮片指纹图谱相似度均大于0.9;山萸肉生品与酒萸肉饮片指纹图谱有明显差异;不同方法制酒萸肉饮片高效液相指纹图谱相比没有差异。不同产地的山萸肉饮片高效液相指纹图谱中峰面积有一定差异。2、通过对大鼠含药血清与空白血清的HPLC指纹图谱进行比较结果表明:山茱萸吸收入血后,生品与制品血清色谱图相比,有一些面积较小的色谱峰出现,可能是酒制后便于吸收的原因;生品与制品血清色谱图与入血前色谱图比较,多数色谱峰均未检测到,可能是药物成分在吸收入血过程中发生了变化,也可能和取血及处理方法有关。山茱萸炮制前后指纹图谱和山萸肉及酒萸肉饮片入血后含药血清指纹图谱在保留时间为20min左右均检测到一色谱峰,虽然入血后含药血清指纹图谱峰面积较入血前降低,但在空白血清和溶剂峰中未检测到,故可能为山茱萸的有效成分色谱峰。
结论:本文在充分参考文献资料的基础上,分析了山茱萸的药效物质,建立了系统的指纹图谱体系,为山茱萸饮片炮制规范化研究打下基础。同时通过对山茱萸炮制前后血清化学的初步研究,山茱萸吸收入血后,生品与制品血清色谱图相比,有一些面积较小的色谱峰出现,因此对该成分进行进一步研究,确定其结构,对山茱萸药理作用机理研究具有较大的意义。
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