论文部分内容阅读
目的：生物节律是生命体的普遍特征之一。从低级生物到高级生物，任何一种生命活动都有其特定的规律性，此即生物节律(Biological Rhythm)。生物节律是生命体的一种基本特征，使生物得以随着环境的改变调节自身生理活动。依据节律的周期长短可将之分为3种类型：近日节律(circadian rhythm)或称昼夜节律(diurnal rhythm)、超日节律(ultradian rhythm)与亚日节律(infradian rhythm)。最为常见且研究最多的是近日节律。近年研究发现，近日节律变异是心血管系统疾病发生发展的独立危险因素。高血压是心脑血管疾病的独立危险因素，大多数高血压患者的正常昼夜节律(杓型节律)发生改变，呈非杓型。研究证实，血管内皮细胞分泌的内皮素(ET)与一氧化氮(NO)的失衡在高血压的发生、发展中起着重要作用。近年研究发现，内皮源性血管活性物质的昼夜节律变化和血压昼夜节律的改变密切相关，二者相互影响。如何控制血压，同时恢复正常血压节律，逆转内皮功能失调，阻断其对靶器官的损害，是当前研究的热点。不同时间服用降压药物对血压昼夜节律和内皮系统功能是否具有调节作用，目前国内外研究结论尚不一致。在此背景下，我们选用比索洛尔不同时间给予大鼠灌服，观察大鼠血浆及心肌组织中内皮素-1(ET-1)、NO、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)浓度或活性和心肌组织eNOSmRNA的表达的变化，及不同时间投药对上述物质的影响，并探讨其分子生物学机制。
方法：清洁级健康雄性SD大鼠128只(购自河北医科大学实验动物中心)，体重250-300克，常规饲养于河北省人民医院动物中心，自由进食，室温维持在22±2℃。随机分为四大组：早07:00灌药组(MT)，晚07:00灌药组(NT)和早对照组(MC)、晚对照组(NC)。每大组各32只。每大组又随机分为4小组，每小组各8只。灌药组每日早07:00和晚07:00给予比索洛尔3mg/Kg灌胃，对照组分别在早07:00和晚07:00给予相同剂量的安慰剂(蒸馏水)灌服。按上述方案饲养喂药4周后，分别于同日24小时内不同时间点(02:00，08:00，14:00，20:00)用鼠尾血压仪测各组大鼠血压并处死MT、NT、MC、NC组的各一小组大鼠，留取血浆、血清和心肌组织。
结果：1.方差分析显示，MT、NT、MC、NC各组血清eNOS活性无统计学差异(P＞0.05)。四组的组织eNOS活性也无统计学差异(P＞0.05)。说明比索洛尔对血清及组织eNOS的活性无明显影响。余弦拟合分析及零振幅检验显示，MT、NT、MC、NC各组血清eNOS活性存在近日节律，四组峰值时点依次为：09:06，09:26，07:51，08:40，振幅有明显差异。四组的组织eNOS活性也有典型近日节律性，峰值时点依次为：14:40，14:14，12:37，12:26，振幅无明显差异。2.方差分析显示，MT、NT、MC、NC各组血清NO浓度无统计学差异(P＞0.05)。四组的组织NO浓度也无统计学差异(P＞0.05)。说明比索洛尔对血清及组织NO的浓度无明显影响。余弦拟合分析及零振幅检验显示，MT、NT、MC、NC各组血清NO呈现典型近日节律，峰值时点依次为：12:47，12:22，10:40，10:36，比索洛尔对血清NO峰值影响不大，但振幅差异较大。各组组织NO呈现典型近日节律，峰值时点依次为：15:55，14:59，14:33，15:03，振幅也有差异。3.方差分析显示，MT、NT、MC、NC各组血浆ET-1浓度存在明显差异，MT和NT组ET-1浓度明显低于MC、NC组，有显著统计学意义(P＜0.0001)。四组的组织ET-1浓度无统计学差异(P＞0.05)。提示比索洛尔可降低血浆ET-1浓度，但对组织ET-1浓度不产生影响。余弦拟合分析及零振幅检验显示，MT、NT、MC、NC各组血浆ET-1浓度存在典型昼夜节律，峰值时点依次为：02:28，23:35，22:28，22:22，振幅有差异。各组组织ET-1浓度存在典型昼夜节律性，峰值时点依次为：02:09，23:14，01:49，02:13，两对照组振幅明显比两灌药组大。4.方差分析显示，MT、NT、MC、NC各组的组织eNOS mRNA的表达无统计学差异(P＞0.05)。提示比索洛尔对组织eNOS活性的表达无明显影响。余弦拟合分析及零振幅检验显示，MT、NT、MC、NC各组的组织eNOS mRNA的表达存在典型昼夜节律性，峰值时点依次为：11:44，11:48，11:41，11:55，各组振幅相同。5.方差分析显示，MT、NT、MC、NC各组的平均血压水平无统计学差异。提示在血压水平正常的大鼠，中等量的比索洛尔可能不会对其产生显著影响。余弦拟合分析及零振幅检验显示，MT、NT、MC、NC各组血压均呈现典型的近日节律性，峰值时点依次为：21:47，21:39，21:10，20:40，而其振幅相同。
结论：1.正常大鼠血和心肌组织中ET-1、NO、eNOS含量或活性存在典型的近日节律特征；心肌组织中eNOSmRNA表达亦呈现明显的近日节律。2.比索洛尔可降低血浆ET-1浓度，但对组织ET-1浓度不产生影响，对血及心肌组织NO、eNOS的活性或浓度无影响。3.比索洛尔对正常血压大鼠血和心肌组织中NO、ET、eNOS含量或活性的时间生物学特征有影响，灌药组和对照组的峰值时间各不相同，振幅有差异。比索洛尔对eNOS的生物学表达无影响。不同灌药时间对上述活性物质的节律影响差异不明显。4.当血压处于正常水平时，中等剂量的对血压可能无显著影响。