【摘 要】
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红细胞生成素(EPO,erythropoietin)是一种刺激骨髓造血的糖蛋白类激素,基因工程方法生产的重组人红细胞生成素在治疗肾性贫血及其它类型的贫血等方面有很好的疗效。为了增加
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红细胞生成素(EPO,erythropoietin)是一种刺激骨髓造血的糖蛋白类激素,基因工程方法生产的重组人红细胞生成素在治疗肾性贫血及其它类型的贫血等方面有很好的疗效。为了增加其生物活性,及延长其半衰期,作者构建了三种不同启动子的重组人红细胞生成素(rhEPO)二聚体真核表达载体pBT-1c、pBT-2s、pBT-3c,及两个rhEPO 单体表达载体pBT-2se,pBT-3ce。比较其转染效率后,选择一种真核表达载体pBT-2s 稳定转染CHO-dhfr-细胞,经MTX加压,筛选到稳定高效表达rhEPO 二聚体融合蛋白的细胞株CHO-BTE,表达量达到33.3μg /106cell?d。经纯化得到rhEPO 二聚体融合蛋白,经检测分子量约为70KD,其体内及体外生物活性均显著高于rhEPO 单体。经大鼠体内的初步药代动力学试验,结果表明,此rhEPO 二聚体融合蛋白在大鼠体内的半衰期比rhEPO 单体半衰期延长。
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