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目的:以党参、米炒党参、蜜炙党参为研究对象,采用化学分析方法比较三者之间成分差异;采用负重游泳及隔日禁食制备脾虚模型和环磷酰胺复制免疫抑制模型,比较不同炮制品健脾益气作用的差异,并采用核磁共振(1H NMR)代谢组学技术初步探讨其作用机制。通过研究为党参传统炮制及不同炮制品临床应用提供科学依据。方法:1.采用紫外-分光光度法(UV-Vis)比较党参不同炮制品多糖含量;采用高效液相色谱法(HPLC)测定党参不同炮制品中5-HMF含量及葡萄糖、果糖含量变化;建立党参HPLC特征图谱方法,比较党参不同炮制品指纹图谱差异。2.采用连续3d腹腔注射环磷酰胺(40mg·kg-1·d-1),复制免疫抑制模型;研究党参及其不同炮制品益气作用,设置对照组、模型组、党参组(3.75g·kg-1)、米炒组(3.75g·kg-1)、蜜炙组(3.75g·kg-1),除对照组外,模型组及党参各炮制品组造模同时治疗给药共计14d,实验结束后腹主动脉取血,摘取十二指肠、空肠和回肠(各约3cm)收集肠黏膜黏液;进行免疫细胞、免疫因子检测以及血清1H NMR代谢组学测试。检测外周血免疫细胞数,T细胞亚群CD4+,CD8+表达的检测。3.采用负重游泳及隔日禁食的双因素造模方法制备脾虚模型,研究党参及其不同炮制品健脾作用,分组及剂量同上,连续造模及给药21d,实验最后一天,记录各组大鼠体重及游泳力竭时间,对血清中总胆固醇、甘油三酯、肌酸激酶、乳酸脱氢酶、葡萄糖进行测定。同时采用1H NMR代谢组学分析党参及其不同炮制品干预脾虚大鼠肌肉内源性代谢产物的变化。结果:1.化学成分比较结果:党参及其不同炮制品总多糖含量没有明显变化,表明米炒,蜜炙对党参总多糖含量没有影响;党参中未检测到5-HMF,而通过米炒、蜜炙的炮制品中可检测到5-HMF,其中蜜炙党参中含量最高;葡萄糖、果糖含量从高到低依次为蜜炙党参>米炒党参>党参;建立了党参及其炮制品HPLC特征指纹图谱,共指出9个共有峰,米炒党参、蜜炙党参较党参有3个特征峰。2.益气结果:党参及其炮制品均可提高免疫低下大鼠血清中白细胞数,B淋巴细胞数及T细胞CD4+/CD8+比值;蜜炙党参及党参对免疫因子IL-2、IgG、sIgA的调节效果优于米炒党参;蜜炙党参可以明显降低免疫低下大鼠血清中亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、丙氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、N-乙酰糖蛋白、O-乙酰糖蛋白、甘油磷酰胆碱的含量,升高萄葡糖、醋酸、缬氨酸,党参及米炒党参对个别差异代谢物有回调作用。提示其作用机制主要通过3条代谢通路来调节免疫作用,分别为缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸代谢,谷氨酸、谷氨酰胺代谢以及丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸代谢。3.健脾结果:党参、蜜炙党参及米炒党参均能明显延长脾虚大鼠的游泳时间(P<0.05),其中,蜜炙党参延长时间最长,对改善大鼠脾虚症的效果最好;但党参及各炮制品对脾虚大鼠的体重则没有明显的影响。代谢组学结果显示,与模型组相比较,蜜炙党参能显著降低脾虚大鼠腓肠肌中的亮氨酸,异亮氨酸,丙氨酸,乙酸,谷氨酸,琥珀酸,鹅肌肽,二甲胺,二甲基甘氨酸,肌酸,磷酰胆碱,甘油磷酰胆碱,牛磺酸,肌苷,延胡索酸,次黄嘌呤,乳酸的含量;升高葡萄糖,甘氨酸的含量。提示可能是通过蜜炙可能会改变和影响糖代谢、氨基酸代谢、脂质代谢和核苷酸代谢有关。结论:党参经过米炒、蜜炙等不同方法炮制,化学成分的种类及含量均有一定差异;围绕其健脾益气的主要功能,相关动物实验表明,与党参、米炒党参相比,蜜炙党参对改善脾虚、气虚证候,效果更佳。