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目的:研究Wnt/β-catenin信号通路在氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)致血管内皮细胞损伤中的作用及分子机制,并探讨色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor, PEDF)对该信号通路的干预作用。方法:体外给予ox-LDL (12.5、25、50、100和150 mg/L)处理人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs) 24 h;给予氯化锂(lithium chloride, LiCl,20mM)或重组人 Dickkopf 相关蛋白 1 (DKK-1,20nM)预处理 HUVECs24h,再加入 ox-LDL (100mg/L)继续刺激 24h;给予 PEDF (50、100、200和400 ng/mL)预处理HUVECs 24 h,或采用小分子干扰RNA(siRNA)技术沉默PEDF表达,再加入ox-LDL (100 mg/L)继续培养24 h。分别采用MTT法、AnnexinV-FITC双染法和SYTO-13/PI双染法检测细胞活力和凋亡情况;试剂盒测定培养液乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)、一氧化氮(nitric oxide,NO )和细胞内丙二醛(malonaldehyde,MDA )、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD);采用DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量;分别采用western blotting和荧光定量PCR技术检测Wnt/β-catenin信号通路活化标志分子β-连环蛋白((β-catenin)、蓬乱蛋白(disheveled-1,Dvl-1)和细胞周期蛋白(CyclinDl)的表达变化及PEDF沉默效率。结果:ox-LDL可显著降低HUVECs活力,增加LDH漏出和凋亡率,并触发氧化应激反应,ROS和MDA生成明显增加,而SOD活性和NO水平显著降低,且呈浓度依赖性。与Wnt/β-catenin信号通路激活剂LiCl相似,ox-LDL呈浓度依赖性上调该信号通路标志分子β-catenin蛋白和mRNA表达、Dvl-1蛋白表达和Cyclin D1 mRNA表达,然而ox-LDL对Wnt/β-catenin信号通路的激活作用可被该信号通路抑制剂DKK-1拮抗而被LiCl促进;另外ox-LDL所诱导的细胞活力降低、LDH漏出和凋亡及氧化应激可被DKK-1拮抗而被LiCl进一步加重。此外,PEDF预处理可减轻ox-LDL所诱导的细胞损伤和凋亡以及β-catenin蛋白和mRNA、Dvl-1蛋白和CyclinD1 mRNA上调,并抑制氧化应激反应;而沉默PEDF表达后,ox-LDL所致HUVECs损伤、β-catenin蛋白和mRNA、Dvl-l蛋白和Cyclin D1 mRNA上调以及氧化应激则进一步加重。结论:Wnt/β-catenin信号通路介导的氧化应激反应参与ox-LDL所诱导的血管内皮细胞损伤和凋亡,而PEDF可通过抑制该信号通路减轻ox-LDL所诱导的内皮损伤。