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陈旧油泥污染具普遍性,其污染物组成复杂,水溶性和生物可利用性均差,污染物浓度较高,对微生物毒性大,除难降解碳源,缺乏其他营养,因此处理难度较大。外源菌与土著菌结合,因提高整个系统微生物抗毒能力,也能丰富油泥中微生物的种类和数量,具强化处理油泥的效力,研究土著菌和外源菌及其相互配合作用,对陈旧油泥污染实际修复具有使用价值。本文以微生物荧光快检方法测定降解体系中的活菌数和重量法测定降解效率为依据,以陈旧油泥中污染物为受试污染物,分别优化5株土著菌与外源菌FF的最优条件,确定6株菌的最佳复配比例,并优化其应用条件,获得以下成果:(1)建立了一种快速、简捷的活细菌总数荧光检测法,确定了微生物活体细胞的最佳染色条件:重悬菌体细胞Tris-HCl溶液pH=8,OD600nm值在0.01~0.30范围,染料浓度1~20μmol/L,染色时间范围20~30 min,染色可固定在室温至37℃范围内;活菌数为105~109 CFU/mL范围内,建立了6株细菌的活菌数标准曲线(R2>0.99);方法重复性、稳定性和准确性好,相对标准偏差RSD<5%。(2)以2 g/L陈旧油泥中污染物为碳源,筛选得到T1菌、T3菌、T5菌、NY菌、NYGB菌等5株优良土著菌和外源菌FF;6株菌均能以烃污染物作为生长碳源,其中T1菌、T3菌、T5菌和FF菌生长速度快,6株菌单一应用最优条件为:初始无机盐pH=8,温度31.5℃。(3)乳酸、草酸、丁二酸等共代谢碳源均能显著促进T5菌在油泥污染物上的生长和降解效率,丁二酸共存促进最明显,且活体细胞多;也能促进FF菌生长和降解效率,0.7 g/L丁二酸共存4 d降解率可提高13%,活菌数提高超过2倍;Rha使T5菌和FF菌降解效率均可提高约10%,且活菌数也明显增多。(4)五株土著菌和外源菌FF处理受试油泥中污染物的最佳比例下,污染物投加1 g/L、接种15%,以丁二酸共存,3 d降解率提高了6%,荧光法测定活菌数显著增多,可达到1.69×1010CFU/m L。