离子交换色谱法研究人亲环素33的RNA结合特异性

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亲环素是器官移植中使用的免疫抑制剂类药物环孢菌素A在胞内的特异性结合蛋白,普遍存在于原核与真核及多种亚细胞结构中.因其具有肽脯氨酰顺反异构酶活性,亲不素类蛋白在新生肽链的折叠、输送和生物大分子的组装过程中起着关键作用.RNA结合蛋白是参与真核生物RNA转录后剪接、修饰和输送等功能的一类蛋白.人亲环素33(human Cyclophilin33 hCyP33)是在T细胞核内发现的一种亲环素类蛋白.从结构上看,它包含两个功能区域:一个N端的RNA结合区域;一个C端的肽脯氨酰顺反异构酶区域,这是首次在同一蛋白中发现共存有这两种活性.为了探究人亲环素33在T细胞核内的细胞生物功能,我们利用离子交换色谱法测定了人亲环素33与不同RNA的结合特异性,配合SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳等生物化学手段可确定人亲环素33只与poly(A)尾序列结构的mRNA发生特异性结合.
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