肿瘤表达谱基因芯片筛选胆囊癌肿瘤相关基因的研究

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目的:使用肿瘤表达谱基因芯片筛查胆囊癌组织标本的异常表达基因。为胆囊癌临床诊断芯片的开发提供数据基础。并验证表达谱芯片筛查胆囊癌基因的可靠性。 方法:收集4例新鲜胆囊癌组织标本和对应的正常对照组织,低温冷冻保存后提取总RNA,分别标记荧光探针后与含4069个基因的BiostarH-40s型肿瘤表达谱芯片杂交。杂交后进行图像扫描和数据分析。并使用real-time PCR对筛查结果进行验证。 结果:共筛查出共同表达的异常基因61条,涉及肿瘤发生发展的各个方面。其中表达下调的基因17调,表达上调的基因44条。其中:原癌基因和抑癌基因9条;细胞凋亡相关的蛋白7条;DNA合成和修复、重组蛋白6条;细胞信号和传递蛋白13条;代谢12条;蛋白翻译合成6;其他8条。选取其中5条基因利用real-timePCR进行扩增,结果证实所选基因在胆囊癌中均有异常表达,与基因芯片的表达情况一致。 结论:基因芯片技术能够低消耗、高灵敏度、高通量地分析细胞内基因的表达谱。通过大量的胆囊癌与胆囊正常组织之间差异表达基因的比较分析,发现了许多新的差异表达的序列。验证结果显示芯片筛查基因表达异常是可靠的。
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