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骨形态发生蛋白（bone morphogenetic protein，BMP）属于转化生长因子-β超家族成员，具有良好的异位诱导成骨作用，大量研究表明其在骨科临床上用来促进骨折愈合，进行关节间融合和防止人工假体松动等方面有良好的应用前景。但是，单靠外源性植入往往不能满足骨损伤修复的需要，而且目前尚缺乏理想的载体。基因治疗作为一种新的治疗方法，与植入基因工程重组的BMP相比，理论上讲具有能够进行BMP持续的释放、避免植入载体等多方面的优点。本研究通过构建人BMP2基因真核表达载体，并将其转染成纤维细胞，探讨人BMP2基因能否在成纤维细胞内稳定表达、外源目的基因BMP2的导入对成纤维细胞生物学性状的影响及表达BMP2的成纤维细胞是否具有体内诱导成骨能力。为将来将人BMP2基因导入自体成纤维细胞，进而将稳定表达人BMP2基因的自体成纤维细胞植入体内进行骨损伤修复的基因治疗奠定基础。 1．重组真核表达载体pcDNA3-hBMP2的构建 本研究采用基因重组技术将全长人BMP2 cDNA定向克隆到真核表达载体pcDNA3内，形成重组真核表达载体pcDNA3-hBMP2，为研究BMP2导入成纤维细胞后的稳定表达、外源目的基因BMP2的导入对成纤维细胞