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目的:血管钙化通常被认为是心血管病致死的独立的危险因素。本实验研究雌激素在尼古丁和维生素D3诱发的大鼠血管钙化变化过程的影响,进一步阐明血管钙化是否是可逆的过程,雌激素对血管钙化的消退有无促进的作用。
方法:96只SD雌性大鼠随机分为对照组和钙化组,其中24只为对照组,72只为钙化组。首先按照文献制备(VDN)大鼠钙化模型,第一天维生素D3300,000IU/kg.肌肉注射,尼古丁(25mg/kg溶于花生油)灌胃,9h后重复灌胃一次,实验第4周末将血管钙化的大鼠随机分为单纯钙化组(VDN),钙化+假手术组(VDN+SHAM),钙化+去势组(VDN+OVX),钙化+去势+补充雌激素组(VDN+OVX+E)。去势组为双侧卵巢切除,假手术组为切开腹腔,暴露双侧卵巢后关闭腹腔(不切除卵巢),去势+补充雌激素组为去势后皮下注射17β-雌二醇50ug/kg/天。放射免疫法测定血浆雌激素水平。在第8周和第12周观察各组血管钙化变化的情况,比较去势和去势补充雌激素对血管钙化的影响。取腹主动脉起始段1cm,固定,石蜡包埋,连续切片,HE及Yon Kossa染色,显微镜下观察。在动物处死后30分钟内,取肾动脉分支上1cm至股动脉分支水平处的腹主动脉段,称重,加入有1ml150mmol/LHcl的2m试管中,试管密封,室温下保存24小时。测得单位组织中钙含量。
结果:
1.按照VDN的方式,在实验第4周大鼠血管出现明显钙化,血管钙含量明显高于对照组,两者有显著性差异(104.5±7.47VS7.29±0.23,P<0.01),同时病理切片发现明显的血管钙化,成功制备了血管钙化的大鼠模型.
2.钙化组大鼠的体重较对照组轻.
3.第8周观察到各组钙化大鼠的血管钙含量均较第4周减少,但是各组减少的程度有所不同,VDN组减少20.59%,VDN+SHAM组减少21.48%,VDN+OVX+E组减少42.36%,VDN组,VDN+OVX组及VDN+OVX+E组比较,各组之间存在显著性差异,P<0.01。而VDN和VDN+SHAM组之间无显著性差异。病理组织观察也符合这一变化。
4.第12周,各组血管钙化进一步减轻,减轻的程度也有所不同。各组之间也存在显著性差异,病理变化类同。
结论:本实验发现大鼠血管钙化是可以消退的。随着时间的延长,已经形成的钙化出现了消退的现象,而在雌激素的作用下,血管钙化消退更加明显。