不同光照射方式对大鼠视网膜ONL厚度及GFAP表达的影响

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【目的】:比较连续性光照射与间歇性光照射对大鼠视网膜的影响,探讨视网膜光损伤的发生机制;检测光损伤后视网膜GFAP的表达,探讨Müller细胞在视网膜光损伤中的作用。 【方法】:Wistar大鼠,雌性,8-10周龄,42只,随机分为正常对照组,连续性与间歇性损伤组,所有的实验用大鼠(包括正常对照组)均在12小时明(90—150Lux)及12小时暗(0 Lux)循环光适应一周;光照射前暗适应24小时,然后接受光照射,用强度为2380±569Lux绿色荧光灯为致伤光源,连续光照射24小时建立连续性光损伤模型;光照射3小时,暗适应3小时,如此反复8次建立间歇性光损伤模型。光照射后3、7、14天取材、石蜡包埋、HE染色、GFAP免疫组化染色,图像分析仪测量视网膜ONL层厚度及GFAP灰度值。采用SPSS11.5软件包进行统计分析。 【结果】:正常Wistar大鼠视网膜形态正常,结构层次分明,内外节排列整齐,分界清晰,内外核层排列紧密,ONL层厚度为43.49±1.45μm;经过24小时光照射后,各个时段均有明显的病理改变,主要表现为:内外节结构紊乱,分界不清,外核层细胞核间隙增大,外丛状层及外核层均变薄。连续性损伤后3、7、14天视网膜ONL层厚度分别较正常减少13.91%、34.01%、35.77%;间歇性损伤后3、7、14天视网膜ONL层厚度分别较正常减少20.64%、40.79%、47.14%。间歇组与连续组同一时间段ONL层厚度相比均有显著差异。正常Wistar大鼠视网膜仅在内界膜可见少许GFAP阳性染色,光照射后GFAP阳性染色明显增强,增强主要在外丛状层和外核层,在外核层GFAP阳性染色呈条索状,与Müller细胞的走向一致。连续性光照射组3、7、14天GFAP灰度值分别为81.63、91.69、75.30;间歇性光照射组3、7、14天GFAP灰度值分别为91.24、98.05、101.87。
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