富硒酵母生产工艺优化及酵母多糖抗PCV2作用的研究

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dengyq2000
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硒是人和动物体内必需的微量元素之一,具有提高机体免疫力、清除体内自由基、抑制脂质过氧化反应等生物学功能;酵母多糖是酵母细胞壁的主要成分,约占细胞壁干重的80%,其和硒一样也可以提高机体免疫力、抗肿瘤、抗病毒等,同时还具有吸附毒素、抗辐射等作用。富硒酵母既含有大量的有机硒(相对于无机硒,具有毒性低、利用率高以及环境污染小等特点),同时还有许多酵母多糖,其作为饲料添加剂可以最大程度地保护动物的健康。本试验通过摇瓶试验得出富硒酵母生产的最佳发酵条件,再利用得出的最佳发酵条件上发酵罐进行扩大培养,优化硒源和营养源的流加速度,最终生产出低成本的富硒酵母。同时,研究酵母多糖抗PCV2作用,并对其作用机理进行初步探讨,为富硒酵母在生产上应用提供理论依据。试验1富硒酵母生产的摇瓶试验本试验通过摇瓶发酵试验对发酵液配方和pH进行优化,并观察分批补硒和分批补加营养对富硒酵母生产的影响。结果显示,发酵液的最佳配方为葡萄糖90g/L、尿素3g/L、玉米浆干粉11g/L;最佳初始pH为5;与一次性添加相比,分批补硒可获得较高的生物量,且在5h、9h、13h时分批添加,生物量可达最佳;在对数生长晚期开始分批补加营养可以进一步提高富硒酵母的生物量,最终生物量可达9.8g/L,单位硒含量接近1700μg/g,硒转化率72.1%。试验2富硒酵母发酵罐扩大培养本试验把经摇瓶试验得到的最优发酵条件应用到发酵罐上,同时采用硒源和营养源流加的方式进行扩大培养。先以不同的恒定流速流加补充培养基,经三次恒流发现,最终生物量可以达到较高值,但是单位硒含量和硒转化率仍然较低,于是,在不同硒浓度条件下进行变速流加,最终发现在中等浓度硒条件下进行变速流加是生物量和单位硒含量达到理想值。生物量达43.76g/L,单位硒含量为1272.45μg/g,硒转化率为66.8%。试验3酵母多糖的抗PCV2作用及其机理的初步研究本试验先用MTT法得出酵母多糖对PK-15细胞最大安全浓度,再观察在PK-15细胞上酵母多糖对PCV2的抑制及直接杀伤作用,最后探讨了酵母多糖对PCV2黏附细胞的影响。结果显示,酵母多糖对PK-15的最大安全浓度为125μg/mL;酵母多糖具有抗PCV2作用,其作用机理为抑制PCV2黏附细胞且能够直接杀伤PCV2。
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