本文应用植物生理学及生物化学的方法研究了脱落酸（ABA）对培养的滇紫草细胞生长及紫草宁合成的影响，并对其对紫草宁生物合成的调控机制进行了初步探讨。 脱落酸（ABA）作为一种植物激素，对植物胚胎发育、种子休眠、果实成熟、气孔运动、逆境胁迫适应等许多方面具有重要的调节作用。但是，关于ABA对植物培养细胞次生物质代谢的作用的报道却很少。在本实验中，我们检测了ABA（浓度分别为0.1mg／L，0.5mg／L，1.0mg／L，5.0mg／L）对滇紫草细胞生长和紫草宁合成的影响，并检测了其对紫草宁合成相关基因及相关酶，如苯丙氨酸解氨酶（PAL）、对羟基苯甲酸香叶儿基转移酶（PHB-geranyltransferase）活性的影响。同时，我们还对ABA处理后紫草细胞内抗氧化酶如超氧化物歧化酶（SOD），过氧化物酶（POD）活性的变化进行了测试。此外，我们检测了能够降低细胞内Ca<2＋>浓度的两种药物：2-氨基乙基二苯硼酸（2-Aminoethyl dipheny1 borate，2-APB）和尼克酰胺（Nicotinamide）对ABA抑制紫草宁合成作用的影响。研究发现无论在B<,5>生长培养基中还是M<,9>生产培养基中，ABA都会抑制紫草愈伤组织的生长，并且这种抑制作用随着ABA浓度的升高而逐渐增强。HPLC分析及分光光度分析表明：ABA能够抑制紫草宁的生物合成，并且发现ABA处理后紫草宁6种组分（Acetyl Shikonin，Deoxy Shikonin，Isobutyry1 Shikonin，β，β-Dimethylacry Shikonin，2-Methyl-n-butyryl Shikonin，Isovalery1 Shikonin）的含量都有所下降。通过RT-PCR技术对紫草宁合成相关基因进行分析，我们发现ABA下调了这些基因的表达量，但对不同基因的影响是不同的。与紫草素合成的第一个前体对羟基苯甲酸（PHB）产生相关的三个酶基因PAL1，C4H2，4CL1及与第二个前体香叶儿基焦磷酸（Geranyl Pyrophosphate）产生相关的酶基因HMGR在ABA处理后，它们的表达量并无显著变化；而编码将这两个前体连接在一起的酶基因LePGTl以及负责紫草素在细胞内运输的LDI2基因在ABA处理后表达量有显著的变化。这说明ABA主要是通过对紫草宁合成关键酶和负责紫草宁运输的蛋白的调控来抑制紫草素合成的。酶活数据也显示ABA抑制了LePGTI编码的对羟基苯甲酸香叶基转移酶活性和PAL1编码的苯丙氨酸解氨酶的活性。对紫草细胞内抗氧化酶的分析表明，与对照相比ABA强烈抑制了POD的活性，却促进了SOD的活性，这说明活性氧如H<,2 >O<,2 >很可能参与了ABA抑制紫草次生代谢的过程。最后我们还发现，2-APB和Nicotinamide这两种可以阻碍细胞内钙库释放钙离子的药物都可以缓解ABA对紫草宁合成的抑制作用，且这种缓解作用在第四天表现得尤为显著。由此我们推测胞内Ca<’2+ >作为ABA信号转导的第二信使，可能介导了ABA对下游与紫草次生代谢相关的基因和酶的调控。