TGFβ<,1>抗体对大鼠肾缺血再灌注时SMAD7表达的影响

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目的:探讨(1)大鼠肾缺血再灌注后不同时间点Smad7的表达;(2)大鼠肾缺血再灌注后在不同时间点注射TGFβ1抗体对Smad7的表达的影响;(3)寻找临床预测急性肾功能衰竭的新指标及治疗的新手段。方法:SD大鼠72只,随机分为A组(假手术组)、B组(肾缺血再灌注损伤模型组)和C组(TGFβ1抗体治疗组),每组按照0h、4h、12h、24h分为四个小组,每小组6只老鼠。其中B、C组建立肾缺血再灌注模型。C组于再灌注后0h、2h、10h、22h经腹腔静脉注射TGF-β1抗体(5mg/kg);B组于相同时间点经腹腔静脉注射等量的生理盐水;A组仅作麻醉、开腹,不阻断血流,并在相同的时间点经腹腔静脉注射等量的生理盐水。再灌注达相应时间点时,从各小组大鼠腹主动脉取血2ml备测血尿素氮(BUN)和血肌酐(Cr),然后迅速切除左肾,肾组织用10%甲醛固定,制备石蜡切片,作HE染色观察病理变化以及作免疫组化分析肾组织Smad7表达情况。采用全自动生化分析仪、免疫组化、HE染色分别测定或观察血肌酐、尿素氮、肾组织Smad7表达、肾组织病理改变。结果:(1)肾功能改变:与同一时间点假手术组比较,模型组各小组血浆BUN均显著升高(P<0.01);TGFβ1抗体处理组中各小组血浆BUN升高(P<0.01)。与同一时间点肾IRI模型组比较,TGFβ1抗体处理组中再灌注4h,12h,24组血BUN明显降低,差异有统计学意义(P<0.01),再灌注0h组血尿素氮与模型组无明显差异(P>0.05)。与同一时间点假手术组比较,模型组各组血浆Cr均高于假手术组(P <0.01),TGFβ1抗体处理组中血浆Cr均高于假手术组(P<0.01,P<0.05)。与同一时间点肾IRI模型组比较,TGFβ1抗体处理各组血Cr较模型组明显降低(P<0.01)。(2)肾脏组织学改变:模型组的肾组织损伤较假手术组明显加重,而TGFβ1抗体处理组的肾组织损伤较模型组明显减轻。(3)肾组织Smad7的表达情况:在0h时肾脏Smad7阳性表达三组表达无差异(P均>0.05)。模型组肾脏Smad7阳性表达较假手术组和TGFβ1抗体处理组在4h、12h、24h均减少(P均<0.01)。TGFβ1抗体处理组肾脏Smad7阳性表达较假手术组在4h、12h均减少(P均<0.01);在0h、24h时与假手术组无差别(P均>0.05)。结论:1.在0h时肾脏Smad7阳性表达在各组无差异;24h时抗体处理组与假手术组Smad7阳性表达无差异;4h、12h、24h模型组较假手术组和抗体处理组Smad7阳性表达均减少;4h、12h时抗体处理组较假手术组Smad7阳性表达减少。2.TGFβ1抗体可减轻大鼠肾缺血再灌注损伤。
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