[目的]　　 研究睾丸局部热作用后生精细胞的凋亡情况；探索各类生精细胞对热的敏感性，对热作用引起生精障碍作更深入研究；研究MPTP的开放与热诱导的生精细胞凋亡之间的关系；研究热作用后HSP70、Bax、Bcl-2、和Caspase-3蛋白在生精细胞的表达情况，在分子水平上探讨热作用诱导生精细胞凋亡的机制。　　 [方法]　　 雄性Sprague-Dawlcy(SD)大鼠40只，随机分为3组：正常对照组、热应激组(HS组)、CsA组(HS+CsA)。CsA组大鼠热应激前按照10mg/(kg.d)剂量，将环孢素A(Cyclosporine A，CsA)溶于生理盐水灌胃，每天一次，连续4d；HS组及正常对照组给予等量生理盐水灌胃。热应激组和CsA组均按热处理后6h和24h随机分成2个亚组(n=8)。热应激组和CsA组大鼠阴囊浸于43℃恒温水浴中40min，对照组浸于22℃水浴中40min。HS组和CsA组分别在处理后6h和24h采取标本，对照组在处理后24h采取标本。应用HE染色检测睾丸组织形态学改变；采用DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪检测和原位末端标记法(TdT-mediateddUDP nick end labeling，TUNEL)检测睾丸局部受热后生精细胞凋亡情况；应用免疫组化法测定HSP70、Bax、Bcl-2、和Caspase-3在热作用后生精细胞的表达情况。　　 [结果]　　 1.组织学观察大鼠睾丸局部受热后，睾丸组织生精上皮变薄，生精细胞排列紊乱，数量减少.24h组较6h组损害更为严重，多数管腔内可见多核巨细胞。　　 2.生精细胞凋亡情况(1)DNA琼脂糖凝胶电泳检测：HS(24)组和CsA(24)组均出现了典型的DNA梯状条带，其中HS(24h)组条带最明显。　　 (2)流式细胞仪检测：热作用后各组均有亚单倍体细胞百分率明显增高(P<0.01)，HS(24h)组增高最明显。对各类生精细胞DNA含量进行分析表明，热处理后24h时1C、4C细胞百分比均明显低于对照组(P<0.01)，其中HS组较CsA组降低更明显。　　 (3)TUNEL法检测：在热作用后24h时对凋亡指数分析发现：除CsA组的Ⅱ-Ⅵ期外，HS组及CsA组的其它群的凋亡指数与对照组相比均明显增高(P<0.01)。热应激后在早期的(Ⅰ)和晚期的(Ⅻ-ⅩⅣ)凋亡发生最多，其次是中期(Ⅶ-Ⅷ)和晚期的(Ⅸ-Ⅺ)，早期的(Ⅱ-Ⅵ)凋亡细胞最少。Ⅰ期TUNEL阳性细胞主要定位在圆形精子细胞，其它各期主要定位在粗线期精母细胞。HS组与CsA组相比，在Ⅰ期、Ⅱ-Ⅵ期、Ⅶ-Ⅷ期和Ⅸ-Ⅺ期的生精小管内CsA组的凋亡指数均明显低于HS组(P<0.01)，在Ⅻ-ⅩⅣ期的生精小管CsA组的凋亡指数也低于HS组但无统计学意义(P>0.05)。　　 3.睾丸组织HSP70、Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达情况对组织切片进行免疫组织化学染色结果显示：热处理后Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白的表达均明显增高，且与TUNEL法检测的凋亡细胞类型及其所处的生精周期基本一致。热处理后HSP70蛋白的表达水平随着时间的延长逐渐下降。　　 [结论]　　 1、热作用引起大鼠睾丸生精上皮的损伤，导致生精障碍，热作用后生精细胞凋亡增加是这种生精障碍的机制之一。　　 2、热作用对生精细胞的损伤具有明显的阶段和细胞特异性.　　 3、抑制线粒体通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore，MPTP)的开放可以减少一部分凋亡，推测MPTP的开放在热诱导的生精细胞凋亡可能发挥了一定的作用。　　 4、在热诱导的生精细胞中Caspase-3、Bax、Bcl-2表达均增强，Hsp70的表达下降，它们均参与了生精细胞凋亡的调控，并且在生精细胞凋亡的凋控中发挥着不同的作用。