人类乙型肝炎病毒HBV可特异侵染人类肝组织,引起急性或慢性乙型肝炎,从而诱发肝硬化、肝癌。目前,世界范围内约有20亿HBV感染引起的肝炎患者,其中约有3.5亿患者转化为慢性乙型肝炎,而世界每年约有60万乙肝患者死亡。我国作为发展中国家,同时也是乙型肝炎的高发区,全国约有1亿乙肝病毒携带者,而慢性乙型肝炎患者更是高达2000万人。虽然,目前预防HBV感染的疫苗已相当成熟,但由于HBV侵染宿主的范围狭窄,在选择实验动物开展相关研究时存在较大限制,导致目前对HBV的侵染机制知之甚少,特别是慢性乙型肝炎的发生机制,从而无法制定有效的治疗策略。树鼩作为灵长类的近亲,由于其对HBV易感且具有个体小、易于饲养等优点,现已成为HBV研究的理想动物模型。目前,针对树鼩免疫系统,特别是一些免疫细胞的标志研究较少,这严重阻碍了树鼩作为一种理想的HBV感染动物模型的进一步应用。对树鼩免疫系统的研究将有可能揭示HBV与宿主间的相互作用,有助于乙型肝炎的预防和治疗。大量实验证明调节性T淋巴细胞(Treg)与各类癌症的发生有着密切的关系,而树鼩Treg细胞的相关标志分子的编码序列却未有报道。因此,本实验以获得树鼩Treg细胞标志分子CD4、CD127全长编码序列为目的,以树鼩外周血总RNA为材料,通过RT-PCR扩增,首次得到了长度分别为1365bp、1392bp的树鼩CD4和CD127全长编码序列,并确定了原预测序列中的未知片段。通过Clustal W等软件对其序列和分子特征进行分析,发现树鼩CD4、CD127氨基酸序列都存在自身的一些保守性序列且都表现出与人、猴较近的亲缘关系。同时,通过Discovery Studio对人和树鼩的CD4、CD127胞外域进行了蛋白三维空间建模,结果显示树鼩CD4、CD127有着与人相应分子相似的胞外域结构,但在部分表面电荷分布、糖基化位点和二硫键数目上存在差异。随后,我们利用慢病毒载体对树鼩CD4的编码序列进行了真核表达,获得了能够高效表达树鼩CD4的HEK293T细胞。本试验首次获得的树鼩CD4、CD127全长编码序列,以及能够高效表达树鼩CD4的HEK293T细胞,为今后树鼩CD4、CD127单克隆抗体制备及功能研究提供了必要条件,同时也为树鼩HBV感染模型的最终建立奠定了基础。