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背景铜是人体必需的微量元素之一,对细胞的生长有调节作用,含量过多则产生毒性。Wilson病（Wilson’s disease,WD）是由于ATP7B基因突变引起的铜代谢障碍性疾病,铜沉积于肝和脑损害相应的功能。尽管WD患者肝脏铜含量通常增高,常出现肝功能损害及肝硬化,但是与病毒性、酒精性等所致肝硬化相比,WD肝硬化癌变率较低。Wilkinson认为WD患者肝脏高铜对肝癌基因的启动可能存在“保护性”抑制现象,即肝脏高铜抑制WD患者肝癌的发生。但是有研究表明高铜体外促进肺癌、乳腺癌的生长和增殖。Wilson病的原发性肝癌（Primary Liver Cancer,PLC）发生率低的原因尚未明确,铜对肝癌的发生、对肝癌细胞增殖及相关铜伴侣蛋白在其中的作用也少见报道。目的1.通过国内外共49例WD并发PLC患者临床资料的回顾性分析,探讨WD并发PLC的特点。为WD患者PLC的诊治提供指导,减少WD并发PLC的发生。2.观察不同浓度的硫酸铜（CuSO4）对人肝癌细胞株Hep G2细胞的形态学、凋亡、细胞生存通路PI3K/Akt-NF-κB和增殖及相关铜伴侣蛋白的影响,揭示铜抑制WD患者肝脏发生癌变的部分机制。方法1.统计中国知网、Pubmed等国内外有关WD并发PLC的报道以及安徽中医药大学神经病学研究所附属医院所有WD患者随访发现PLC者,尽可能全面地统计它们的性别,确诊WD和PLC的年龄,病程,是否有肝炎或肝硬化,确诊为WD和发生PLC前的血清铜生化指标、肝功能指标、肝脏B超或CT表现,肝脏铜含量、AFP以及针对WD和PLC的治疗,探讨WD并发PLC的临床特点。2.用含不同浓度CuSO4的RPMI-1640培养液孵育Hep G2细胞不同时间,四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测其对细胞增殖的抑制作用;倒置显微镜下观察不同CuSO4浓度组Hep G2细胞的形态学表现,DAPI染色观察细胞凋亡及形态学改变,用原子吸收法（AAS）测定不同CuSO4浓度组细胞内的铜含量,Western blot检测各组细胞PI3K p85、Akt、p-Akt、NF-κB p65、ATP7B以及铜伴侣蛋白h CTR1、h CCC2、h COX17和HAH1的蛋白表达水平的影响。结果1.国内外共49例WD并发PLC患者的临床特点:（1）国外共37例WD并发PLC患者的临床特点:男:女为29:8。确诊WD的年龄平均（25.94±14.21）岁,确诊PLC的年龄平均（39.78±21.01）岁,病程平均（18.51±13.43）年。首发症状包括黄疸,腹水,震颤,构音障碍等。确诊WD和/或PLC时血清铜和/或铜蓝蛋白低于正常;ALT和AST增高;AFP升高;肝脏铜含量增高;无病毒性肝炎而有肝硬化;服用青霉胺等排铜药物时间较长。（2）国内共12例WD并发PLC患者的临床特点:男:女为11:1。确诊WD的年龄平均（40.58±8.32）岁;确诊PLC的年龄平均（54.25±0.87）岁;病程平均（15.33±7.99）年。首发症状及铜生化、肝功能、AFP等结果与国外的相似。2.CuSO4对Hep G2细胞的形态学、凋亡、生存和增殖及相关铜伴侣蛋白的影响:（1）MTT结果表明CuSO4可时间和浓度依赖性地抑制Hep G2细胞的增殖。（2）Western blot结果显示CuSO4可下调PI3K p85、Akt（P<0.001）、p-Akt（P<0.001）和NF-κB p65（P<0.001）蛋白的表达水平。（3）Western blot结果显示CuSO4可下调ATP7B、铜伴侣蛋白hCTR1和hCOX17蛋白表达水平,上调h CCC2和HAH1蛋白的表达水平。结论1.WD并发PLC中男性多于女性,且均无病毒性肝炎而有肝硬化,有较长的青霉胺等排铜药物服用史。2.WD和PLC的确诊年龄国内大于国外,但均较大,WD的诊断仍然存在误诊。3.CuSO4可抑制Hep G2细胞的生存和增殖,并促进其凋亡。可作为解释WD的PLC发生率低的部分原因。