小球藻和雨生红球藻对珍珠龙胆石斑鱼幼鱼生长、生理生化影响及转录组学分析

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藻类是天然的饲料添加剂,对提高鱼体的免疫活性和抗氧化性有重要作用。小球藻(Chlorella vulgaris)为绿藻门小球藻属,具有抗氧化、增强机体免疫和抗病毒感染等作用;雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)为绿藻门红球藻属,体内含有丰富的虾青素,是当前公认的虾青素最佳生物来源。本研究采用静水养殖法,在饲料中添加小球藻和雨生红球藻,研究其对珍珠龙胆石斑鱼生长、中肾抗氧化能力及组织结构的影响和转录组学分析。以期为小球藻和雨生红球藻作为功能性绿色添加剂在珍珠龙胆石斑鱼饲料中的应用提供参考,为珍珠龙胆石斑鱼增养殖提供数据支持。试验选取720尾鱼,随机分为3组,每组3个重复,每个重复80尾,对照组(DZ)投喂基础饲料,小球藻组(Chl)投喂小球藻混合饲料(10%),雨生红球藻组(Hap)投喂雨生红球藻混合饲料(10%)。养殖周期为60d,分别在15d和60d时取样检测。试验结果如下:1、在饲料中添加10%的小球藻可以提高珍珠龙胆石斑鱼幼鱼超氧化物歧化酶(SOD)活性,降低谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和过氧化氢酶(CAT)活性;而添加10%的雨生红球藻可提高SOD、GSH-PX和碱性磷酸酶(AKP)活性,降低CAT活性。两种藻类对石斑鱼增重率、特定生长率、肝体比及脾体比等生长指标无显著影响。2、通过对珍珠龙胆石斑鱼中肾进行转录组测序,共获得Clean Reads 115.01 Gb,各样品碱基总数在5.88~7.54 G之间,Q20大于95.78%,Q30大于90.42%,总碱基GC含量在43.29%~48.62%之间。采用Trinity对Clean Reads进行拼接,共得到Unigene103,230条,总长度为119,515,719 bp,平均长度为1,157.76 bp。3、15d时对照组与Chl组的差异基因(DEGs)为4086个,其中上调基因1663个,下调基因2423个;60d时对照组与Chl组的DEGs为2911个,其中上调基因1625个,下调基因1286个;两组共有DEGs 259个。通过KEGG富集分析发现,15d时小球藻通过上调CPT1、PGAR等基因来调节脂质代谢,60d时小球藻通过下调免疫基因IL-1β提高机体免疫。4、15d时对照组与Hap组的DEGs为3641个,其中上调基因1356个,下调基因2285个;60d时对照组与Hap组的DEGs为11383个,其中上调基因5597个,下调基因5786个;两组共有DEGs 1239个。通过KEGG富集分析发现,15d时雨生红球藻通过上调CD22的表达,调节B细胞免疫;60d时雨生红球藻通过下调免疫基因TLR2和TLR5表达,抑制促炎因子的合成,从而提高机体免疫。
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