YB-1蛋白在人类不同肺癌细胞株中的表达

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背景:研究发现人类肿瘤是一种细胞周期性疾病,人类YB-1蛋白(Y box-binding protein-1)作为细胞周期重要的正向调控因子和肿瘤细胞化疗耐药调控因子,能特异地出现于肿瘤组织中,肺癌早期即出现人类YB-1蛋白的表达异常。目前,国内对肺癌细胞YB-1蛋白的表达情况和不同肺癌细胞YB-1蛋白表达的差异等研究尚少。目的:分析肺癌细胞中YB-1蛋白的表达情况和不同类型肺癌细胞表达的差异,初步探讨YB-1基因可否作为新的癌基因,YB-1蛋白可否作为肺癌新的肿瘤标记物,从而为肺癌的分子治疗靶点提供线索。方法:〔1〕人工培养95-D高转移肺癌细胞、NCI-H446小细胞肺癌细胞、SPC-A-1肺腺癌细胞三种肺癌细胞株。(2)抽提人肺癌细胞及正常肺组织总RNA进行逆转录反应,经PCR扩增目的片段及β-actin对照片段,以YB-1和β-actin扩增片段的图像强度比值表示YB-1 mRNA的表达水平。(3)抽提人肺癌细胞及正常肺组织的蛋白,以western blot检测其表达水平,以YB-1蛋白和对照β-actin蛋白的图像强度比值表示YB-1蛋白的含量水平,并分析YB-1蛋白在肺癌细胞和正常肺组织的表达情况以及在不同肺癌细胞中表达的差异。(4)以流式细胞仪检测不同类型肺癌细胞的DNA含量,并分析其DNA含量与肺癌的分化程度与转移特性的关系。结果: YB-1 mRNA、YB-1蛋白在三种肺癌细胞中均较正常肺组织高表达,且三种肺癌细胞的表达水平存在差异。结合三种肺癌细胞DNA含量检测结果,95-D细胞、NCI-H446细胞、SPC-A-1细胞三者间存在相关性,即三种肺癌细胞在YB-1 mRNA表达、YB-1蛋白水平以及四倍体、多倍体含量存在统计学差异(95-D>NCI-H446,NCI-H446>SPC-A-1)。结论:YB-1蛋白可能是肺癌新的肿瘤标记物,且和肺癌的分化程度和转移特性有一定关联性,它有可能成为肺癌新的分子治疗靶点。
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