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目的: 通过观察小鼠免疫后前期抗原分布情况以及最终各个次级淋巴结的T细胞反应,来探索两者之间的相关性,从而尝试建立一种方法学,通过前期抗原分布来预测最终次级淋巴结中的反应强度,为最终的定向诱导活化提供一定的科学基础。 材料与方法: 1.使用Event Blue染料以及OVA-488荧光蛋白来观察免疫后抗原在各个次级淋巴结中的分布情况,并用CFSE标记过的CD8+T细胞来观察免疫后次级淋巴结中T细胞的增殖情况,最后用Elispot检测各部位在效应期以及记忆期其T细胞反应情况,将最终的细胞反应情况与抗原分布情况进行相关性分析。 2.将蛋白、DNA以及rTTV形式的免疫原进行组合使用,同时也进行不同免疫途径的组合,观察免疫原以及免疫部位的改变是否会影响最终次级淋巴结中T细胞的反应情况。 结果: 1.进行后肢免疫之后抗原主要分布于iliac、腹股沟淋巴结,少部分分布于腋窝淋巴结,前肢免疫之后抗原主要分布于腋窝淋巴结,且只是在这些部位中发生了T细胞的增殖。在随后的效应期以及记忆期T细胞反应检测中,后肢免疫在iliac、腹股沟淋巴结、腋窝淋巴结中活化的特异性免疫反应要强于其余淋巴结,而前肢免疫在腋窝淋巴结中活化的反应明显高于其余淋巴结,两种免疫方式都能在脾脏中诱导出较好的T细胞反应。 2.将蛋白形式的免疫原换为DNA或者rTTV之后,不同的单一免疫途径下观察到的现象并没有改变,后肢免疫活化iliac、腹股沟淋巴结以及腋窝淋巴结,而前肢免疫只是活化腋窝淋巴结。在进行前肢初免一后肢加强的实验中,相对于单一的前肢免疫,不仅仅是在腋窝淋巴结,在iliac和腹股沟淋巴结也诱导出较好的T细胞免疫反应。 结论: 1.免疫初期的抗原分布情况决定着最终各部位在效应期以及记忆期的T细胞反应,在抗原到达的淋巴结中会发生T细胞的增殖,并最终形成较好的效应性以及记忆性T细胞反应。 2.抗原分布与T细胞反应之间的这种关联性,并不会因为抗原形式的改变而改变;且不同的免疫途径的组合,可以使具有很好T细胞反应的淋巴结的范围更广泛。