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第一部分:在生理pH(7.43)条件下,人血清白蛋白(human serum albumin,简称HSA)和色氨酸(tryptophane,简称Trp)在344nm和360nm分别产生荧光峰;在688nm和720nm分别产生1/2分频荧光峰。考察了分频荧光峰与荧光峰的半峰宽之比和峰高之比,发现它们分别接近一常数。两者具有相似的荧光特性。加入在色氨酸荧光峰波长处有强吸收的物质,荧光峰和分频荧光峰强度均同时减弱;当入射光波长大于荧光峰波长时,荧光峰和分频荧光峰均不出现。依据非线性光学原理和分频原理,探讨了半峰宽与中心波长(荧光峰波长)的关系及分频荧光峰产生的原因。 第二部分:在生理pH(7.43)条件下,DNA在470nm和350nm处分别产生最强共振散射峰和次强共振散射峰。固定激发波长,扫描发射波长,DNA溶液将产生瑞利共振散射峰、分频共振散射峰和倍频共振散射峰。研究了pH、离子强度、表面活性剂等对共振散射光强度的影响,由此可推测DNA分子结构与构象的变化。依据量子电动力学原理,探讨了由普通单色光引起的各种共振散射峰产生的机理,分析了各种共振散射峰强度不同的原因。 第三部分:利用金属配阴离子与蛋白质结合成超分子离子缔合物及界面的形成,采用共振散射技术建立蛋白质定量测定方法。在2.0×10’3mol.dm’3HCl介质中,蛋白质与[Fe(CN)‘]·通过静电引力为主的分子间作用力结合成超分子离子缔合物,在350nm处产生最强共振散射光信号。基于这一现象可以测定低至0.3μg.ml’~的人血清白蛋白。工作曲线在0-12μg.ml’’范围内呈线性关系。这一新方法的灵敏度比Coomassie 广西师范大学硕士论文:HSA的分频荧光及洲A和HSA的共振散射光谱研究 亮蓝法高 3倍.研究T pH、离子强度和厂e(CN)61s-浓度对反应体系 的作用。将这一方法用子合成样品的微量蛋白质测定,结果满意.