γ-亚麻酸(GLA)是一种十八碳三烯全顺式不饱和脂肪酸,对人体的激素调节及脂仿酸代谢发挥着重要的生理作用.该室经多年筛选,诱变得到一株高产γ-亚麻酸的生产菌株——深黄被孢霉M<,6-22>.△<6>脂肪酸脱氢酶(D6D)是生成GLA的限速酶,因此从深黄被孢霉M<,6-22>中克隆出D6D基因对真菌分子生物学研究具有重要意义.该文根据已发表的一株高山被孢霉的基因序列,设计两对引物.首先对高山被孢霉16266株的D6D基因片段进行了RT-PCR扩增,得到了目的片段,两对引物扩增出的片段长度分别为1.0kb和1.3kb.然后在此基础上又对深黄被孢霉M<,6-22>的D6D基因片段进行了RT-PCR扩增,得到了目的片段,结构基因全长为1374bp.可作为深黄被孢霉△<6>-脂肪酸脱氢酶基因探针,并为下一步构建工程菌株和转基因植物打下了坚实的基础.然后对深黄被孢霉M<,6-22> mRNA的表达水平进行了初步研究.提取了不同生长阶段的深黄被孢霉M<,6-22>的总RNA,通过RT-PCR反应,并结合直接扫描和Southern杂交的方法,检测了培养时间对D6D基因表达水平的影响,结果表明深黄被孢霉M<,6-22>的mRNA分子在菌体培养至72小时丰度最高.