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目的 从蛋白和mRNA水平研究导管内增生性病变中Skp2和p27kipl异常与乳腺癌发生之间的相关性,以及浸润性癌中Skp2蛋白表达异常与其临床病理特征之间的相关性。方法1 免疫组织化学法:采用免疫组织化学法分别检测120例导管内增生性病变,包括普通型导管上皮增生(UDH,usual ductal hyperplasia),平坦型上皮不典型性(FEA,flat epithelial atypia),不典型导管上皮增生(ADH,atypical ductal hyperplasia),导管原位癌(DCIS,ductal carcinoma in situ)各30例石蜡包埋组织中Skp2和p27kipl蛋白表达和56例浸润性乳腺癌中Skp2蛋白的表达情况,分析比较四组病变中Skp2和p27kipl蛋白阳性表达率以及这两种蛋白的表达的相关性,分析比较浸润性癌组织学Ⅰ-Ⅱ级与Ⅲ级之间Skp2蛋白表达阳性率的差异,淋巴结转移(+)组与(-)组之间Skp2蛋白表达阳性率的差异;2定性RT-PCR:提取60例导管内增生性病变新鲜组织中总RNA,其中UDH组,FEA组,ADH组和DCIS各15例,采用逆转录反应,将RNA逆转为cDNA,用特异性引物,PCR反应体系实现Skp2和p27kipl大量扩增,产物长度:Skp2 108bp;p27kipl 177bp;3实时荧光定量RT-PCR:采用逆转录反应体系将RNA逆转为cDNA,用特异性引物,实时荧光定量PCR反应体系实现Skp2和p27kipl大量扩增,产物长度:Skp2 108bp;p27kipl 177bp;引物与定性PCR相同。每例标本每个指标进行3管平行反应:Skp2×3管,p27kipl×3管,内参照基因:β-actin×3管。结果1 DCIS组,ADH组和FEA组Skp2蛋白阳性表达率均高于UDH组(p=0.000,p=0.038,p=0.038),DCIS组Skp2蛋白阳性表达率高于ADH组和FEA组(p=0.030,p=0.030),ADH组和FEA组之间无显著性差异(p=1.000);P27kipl蛋白在DCIS组阳性表达率低于UDH组,ADH组和FEA组(p=0.000,p=0.039,p=0.010),ADH组和FEA组之间无显著性差异(p=0.795),UDH组与ADH组之间无显著性差异(p=0.069),UDH组与FEA组之间无显著性差异(p=0.192)。Skp2与p27kipl阳性细胞率在四组导管内增生性