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目的风湿性心脏病(rheumatic heart disease,RHD)在我国是一种常见病,多发病。早期受A组β-溶血性链球菌感染,导致风湿热的发生,并经过长期的发展,使心脏瓣膜组织发生增生及纤维化病变,最终导致瓣膜的功能丧失。在我国,RHD仍具有较高的患病率,是导致慢性心力衰竭及致死的主要心血管疾病之一,严重危害了青壮年的健康,并给他们带来巨大的经济负担。β-溶血性链球菌感染及风湿热的发生,在风湿性心脏瓣膜病的起病作用已经得到公认。然而在长期的慢性发展中,心脏瓣膜组织是如何缓慢发生病变并导致风湿性心脏病,其作用机制如何,目前尚不明确。因此,充分了解和认识RHD瓣膜病变的发生机制,探寻其关键靶点,为进一步防治病变的发生发展,提高青壮年的健康水平,减轻社会经济负担,具有举足轻重的意义。方法选取2014年1月至2015年6月我院心脏外科住院病人中风湿心脏病二尖瓣狭窄伴关闭不全患者78例(RHD组),其中男性41例,女性37例,年龄35~62岁,平均年龄为(52.8±6.3)岁。另外73例为非风湿性心脏病患者(CON组),主要为前叶、后叶腱索断裂及先天性因素导致二尖瓣中重度关闭不全,且因瓣膜损害严重,不宜成形患者,其中男性38例,女性35例,年龄34~65岁,平均年龄为(50.5±5.4)岁。术前均经心脏彩超仔细评估瓣膜形态及增厚程度,并留取患者的血液标本;术中观察瓣膜外观、形态、厚薄程度,切除并留取瓣膜标本送检,分别研究两组瓣膜组织的病理改变、纤维组织的增生、CD4+T淋巴细胞在两组瓣膜的浸润和表达、转化生长因β1(transforming growth factor-beta1,TGF-β1)表达、MAPK家族中(p38、JNK、ERK)和TGF-β1及I型胶原纤维(I-collagen)的基因及蛋白表达情况。通过流式细胞技术(FCM)检测两组患者外周血CD4+T细胞的分布情况;通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测两组患者血清转化生长因子β1的浓度情况;通过he染色了解瓣膜的病理变化;通过masson染色检测瓣膜组织的纤维化情况;通过免疫组织化学(ihc)检测瓣膜组织中cd4+t细胞的浸润及tgf-β1、α平滑肌肌动蛋白(α-sma)、mapk家族(p38、jnk、erk)的蛋白表达情况;通过实时荧光定量pcr(qrt-pcr)及免疫印迹(westernblotting)法检测两组瓣膜组织中tgf-β、p38、jnk、erk1/2、i型胶原纤维(i-collagen)、α-sma的基因及蛋白表达情况。结果超声可见风湿性心脏病组瓣膜明显增厚、瓣口狭窄,伴有不同程度钙化,开放受限或关闭全,而对照组可见腱索断裂,呈挥鞭样运动,关闭时瓣叶脱入左房,或瓣叶伴有裂缺,发育欠佳。瓣膜无明显增厚,不伴有钙化,均伴有中和(或)重度关闭不全。术中标本肉眼观可见风湿性心脏病组瓣叶显著增厚、呈黄白色、透亮度消失,交界粘连、部分钙化、腱索挛缩,韧性增强,难以剪断,而对照组瓣叶较为薄弱,柔软,瓣叶较为透明,交界无粘连,不伴有钙化,腱索无挛缩。风湿性心脏病组外周血cd4+t细胞占外周血总淋巴细胞术的百分比分布在均数±标准差为(46.1±4.7%)的区间内较对照组(35.8±5.0%)分布的百分比区间增高,有统计学差异(p<0.05);瓣膜组织中风湿性心脏病组cd4+t细胞的浸润(27.2±6.1)亦高于con组(11.5±3.3),统计有显著性差异(p<0.01)。而rhd组外周血清中tgf-β1的浓度(23.465±1.367ng/ml)较con组(31.326±2.087ng/ml)降低,有显著性统计学差异(p<0.05),但是免疫组织化学(ihc)及免疫印迹(westernblotting)检测的结果示风湿性心脏病组瓣膜组织中tgf-β1蛋白的表达高于对照组。westernblotting结果显示丝裂原活化蛋白家族(mapk)两组中总蛋白没有差异,但是westernblotting及ihc结果显示rhd组瓣膜中jnk及p38的磷酸化(p-jnk、p-p38)较con组升高,尤其是p-jnk较con组显著增高,具有显著性统计学差异(p<0.01),而erk的磷酸化(p-erk1/2)两组变化不大,无统计学意义;但是通过实时荧光定量pcr技术发现两组瓣膜组织中(jnk、p38、erk1/2)的信使核糖核酸(mrna)没有差异;然而在瓣膜组织中风湿性心脏病组i型胶原蛋白的合成和表达较对照组明显升高,且实时荧光定量pcr(qrt-pcr)发现风湿性心脏病组tgf-β1和i型胶原蛋白的mrna较对照显著增高,且均有显著性统计学意义(p<0.01);westernblotting及免疫组织化学结果显示RHD组α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达较对照组稍增高,但无统计学意义。结论CD4+T淋巴细胞参与并维持了风湿热至风湿性心脏病的慢性过程,并分泌和表达TGF-β1因子;而TGF-β1与瓣膜间质细胞(valve interstitial cell,VIC)受体结合,进一步激活MAPK,通过TGF-β1/MAPK通路将信号转移到核内,从而引起胶原纤维合成增加和间质细胞的增生,促进了瓣膜组织纤维化及增生的病变发展。CD4+T淋巴细胞及TGF-β1/MAPK信号通路参与了风湿性心脏病瓣膜病变的过程,是病变发展的重要环节,对其深入研究将有望为揭开RHD瓣膜病变的发病机制提供新的思路和靶点。