【摘 要】
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由于虾类养殖生产的发展和需要,有关经济虾蟹类繁殖方面的内分泌学研究日益受到重视.罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)是我国主要的淡水养殖虾类,明确其卵巢发育调节机理
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由于虾类养殖生产的发展和需要,有关经济虾蟹类繁殖方面的内分泌学研究日益受到重视.罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)是我国主要的淡水养殖虾类,明确其卵巢发育调节机理可促进其养殖的发展,也有助于阐明其它虾类的卵巢发育机理.该实验以罗氏沼虾为研究对象,对其卵黄磷蛋白(Vitellin,Vn)进行了纯化和电泳分析.通过凝胶过滤层析和离子交换层析,纯化分离了罗氏沼虾Vn,PAS染色和苏丹黑染色表明罗氏沼虾Vn属于糖脂蛋白,SDS-PAGE分析指出纯化的罗氏沼虾 Vn由两个基组成,分子量分别约为78和97kDa,SDS-PAGE后PAS染色显示78kDa蛋白亚基属于糖蛋白.为了进一步研究虾脑促性腺激素(Gonad-stimulating hormone,GSH)的活性作用,我们对罗氏沼虾雌虾脑蛋白进行凝胶过滤层析(Sepharose G-50),初步纯化分离出有GSH活性的组分,然后用高效液相色谱(HPLC)对有活性的组分进一步纯化,得到8个蛋白峰.通过体外培养、同位素和免疫沉淀反应检测HPLC各蛋白峰的GSH活性,结果表明HPLC产物峰1对罗氏沼虾卵巢总蛋白合成有显著促进作用(P<0.05),但对罗氏沼虾Vn合成却没有促进作用(P<0.05);HPLC产物峰7对罗氏沼虾卵巢总蛋白合成有非常显著的促进作用(P<0.05)和对其Vn的合成有显著促进作用(P<0.05),表明峰7中含有具GSH活性的物质.
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