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第一部分 低频超声辐照抑制裸鼠移植乳腺癌的参数选择目的：探讨低频超声辐照治疗裸鼠移植乳腺癌较适宜的超声参数组合。方法：用细胞移植的方法构建裸鼠移植乳腺癌模型,30只荷瘤裸鼠根据超声强度占空比的不同组合随机分为6组(n=5),其中第1组为对照组(“空照”组),超声强度0 W/cm2、占空比0；第2-6分别为辐照组,超声强度和占空比分为0.5 W/cm2、20%,1 W/cm2、20%,1 W/cm2、50%,2 W/cm2、50%和2 W/cmm2、100%。以预定的超声参数组合进行5mmin“空照”或辐照,观察处理后10天内各组裸鼠生存和瘤体生长情况,观察结束后处死全部裸鼠,并获取瘤体标本。H-E染色观察各组瘤体组织学改变情况,TUNEL染色检测肿瘤细胞凋亡情况,并计算凋亡指数(AI)。结果：①辐照后,除第6组裸鼠死亡1只外,其他裸鼠全部存活,存活裸鼠组织学差异不明显；②处死前与辐照前比较,各组裸鼠瘤体体积均不同程度增长(P<0.01)；处死前各组瘤体组间比较,第1-4组[(2.134±0.248)cm3、(2.114±0.277)cm3、(2.063±0.192)cm3、(2.016±0.231)cm3]组间差异无统计学意义(P>0.05),第5、6组组间差异无统计学意义[(1.704±0.209)cm3、(1.670±0.095)cm3](P>0.05),但第5、6组瘤体体积均明显小于第1-4组(P<0.01)；③随辐照剂量的增加,肿瘤细胞凋亡增多,其中以第5、6组AI最高[(17.23±0.59)%、(17.92±0.67)%],与1-4组[(4.74±0.34)%、(7.03±0.69)%、(9.75±0.41)%、(11.83±0.66)%]比较,差异均有统计学意义(P<0.01),但第5、6组组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论1、强度2 W/cm2、占空比50%和时间5min是1MHz低频超声辐照治疗裸鼠移植乳腺癌适宜、安全的治疗参数组合。第二部分 微泡增强低频超声空化效应抑制裸鼠移植乳腺癌的实验研究目的：观察低频超声联合微泡辐照治疗裸鼠移植乳腺癌的效果,并探讨可能的机制。方法：用细胞移植的方法构建20只裸鼠移植乳腺癌模型,随机平均分为空白对照组、单纯微泡组、单纯超声组和超声微泡组,每组5只。超声微泡组：尾静脉缓慢注射0.2ml SonoVue微泡的同时,对瘤体进行1MHz的超声辐照,超声强度为2 W/cm2、占空比为50%；单纯超声组：尾静脉注射0.2ml生理盐水的同时,对瘤体进行与超声微泡组相同条件的超声辐照；单纯微泡组：尾静脉缓慢注射0.2ml SonoVue微泡的同时,对瘤体进行空照；空白对照组：尾静脉注射0.2ml生理盐水的同时,对瘤体进行空照。所有裸鼠隔天辐照或空照一次,时间5min/每次,共三次。处理结束后继续饲养6天,游标卡尺于每次辐照前和末次辐照后隔天测量流体大小,共6次,计算瘤体体积和抑瘤率(IRT)；末次测量瘤体大小后处死所有裸鼠,病理学检查组织学改变情况、肿瘤细胞凋亡和和微血管改变情况,计算并比较凋亡指数(AI)和微血管密度(MVD)。结果：①超声微泡组瘤体生长受到明显抑制,超声微泡组瘤体体积[(0.864±0.493)cm3]明显小于单纯超声组[(1.666+0.131)cm3]、单纯微泡组[(2.067±0.281)cm3]和空白对照组[(1.841±0.248)cm3](P<0.01),而超声微泡组IRT(58.25%)明显大于单纯超声组(19.45%)和单纯微泡组(10.98%)(P<0.01)。②各组瘤体组织学改变差异不明显,但超声微泡组AI[(49.02±2.85)%]明显大于单纯超声组[(11.04±0.34)%]、单纯微泡组[(6.15±0.29)%]和空白对照组[(4.68±0.22)%](P<0.01),且MVD(3.75±0.36)明显小于单纯超声组(6.59±0.24)、单纯微泡组(10.48±0.44)和空白对照组(10.93±0.37)(P<0.01)。结论1MHZ的低频超声联合微泡辐照可有效抑制裸鼠移植乳腺癌的生长,其机制可能是超声空化效应直接破坏肿瘤的新生血管,并导致肿瘤细胞凋亡有关。第三部分 多模态超声评价低频超声联合微泡辐照抑制乳腺癌的效果目的：探讨多模态超声(包括常规超声中的2DUS和CDFI、弹性成像中的RTE和VTQ、ABVS以及CEUS)评价低频超声辐照治疗乳腺癌疗效的效果。方法：用细胞移植的方法构建20只裸鼠移植乳腺癌模型,随机平均分为对照组和治疗组,每组5只。治疗组：尾静脉缓慢注射0.2ml SonoVue微泡的同时,对瘤体进行1MHz的超声辐照5min,超声强度为2 W/cm2、占空比为50%；对照组：尾静脉注射0.2ml生理盐水的同时,对瘤体进行空照5min,所有裸鼠隔天辐照或空照一次,共三次。处理结束后继续饲养6天,于首次处理前和处死前个进行一次全面的多模态超声检查,完成多模态超声检查后处死所有裸鼠,游标卡尺测量瘤体大小并计算体积,病理学检查组织学改变情况、肿瘤细胞凋亡和和微血管改变情况,计算并比较凋亡指数(AI)和微血管密度(MVD)。多模态超声检查中2DUS和ABVS观察瘤体形态学特征,测量瘤体大小并计算瘤体体积；RTE依据弹性图对瘤体硬度由低到高评为1-5分,VTQ检测瘤体横向剪切波速度(SWV)；CDFI根据血流图对瘤体血流有少到多分为0～Ⅲ级,CEUS造影图像实时观察瘤体灌注情况,CEUS时间-强度曲线分析峰值强度(Peak)、达峰时间(Tp)、曲线下面积(AUC)和平均通过时间(MTT)等参数。治疗组辐照后所有数据与治疗前、对照组处理后进行比较,其中2DUS和ABVS末次测量结果还与游标卡尺测量结果进行比较。结果：①治疗组组织学改变不明显,但AI[[(48.71±2.38)%]明显大于对照组[(4.77±0.26)%](P<0.01),且MVD(3.82±0.31)明显小于对照组(10.59±0.64)(P<0.01)。②治疗组瘤体生长受到明显抑制,治疗组处死前2DUS测量瘤体体积[(0.507±0.095)cm3]明显小于对照组[(0.802±0.109)cm3](P<0.01),而2DUS测量结果与ABVS、裸鼠出死后游标卡尺测量结果差异无统计学意义(P>0.05)。③治疗前后RTE评分均以4-5分多见,治疗组处死前弹性评分与治疗前、对照组差异无统计学意义(P>0.05),但处死前VTQ测量SWV[(2.08±0.24)m/s]结果明显小于治疗前[(2.61±0.21)m/s]、对照组[(2.75+0.27)m/s](P<0.05)。④治疗前后CDFI分级均以0-Ⅱ级多见,治疗组处死前血流分级与治疗前、对照组差异无统计学意义(P>0.05),但CEUS实时观察显示处死前治疗组灌注明显降低,时间-强度曲线参数中Peak和AUC[(28.70±6.75)%, [(1564.20±449.22)%s]明显小于治疗前[(54.20±6.18)%,(2954.00±702.66)%s]、对照组[(56.70±8.55)%,(2978.80±633.75)%s](P<0.01)；而Tp、MTT与治疗前、对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论多模态超声中2DUS、ABVS、VTQ、CEUS及其时间-强度曲线分析,可以从形态学、组织硬度和血流灌注等全方位对低频超声联合微泡辐照治疗裸鼠移植乳腺癌疗效进行有效评价。