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番茄灰霉病是棚室番茄栽培中的重要病害之一,对番茄生产造成了很大危害。本实验前期从江苏江阴萝卜根际土壤中分离到一株拮抗细菌JY1-5,其能够抑制番茄灰霉病菌的生长,同时对多种植物病原真菌有较好的拮抗作用。为进一步研究和利用该生防细菌,本文测定了该细菌在棚室栽培中对番茄灰霉病的防病效果,对JY1-5的分类地位、抗菌物质产生培养条件、抗菌物质提取及鉴定进行了初步研究。2016、2017连续两年在蒋王农业观光园番茄温室大棚进行防病接种实验,结果表明JY1-5对番茄灰霉病防效均在32%以上,且防病效果明显高于药剂腐霉利。经16SrRNA基因序列分析及相关生理生化特征检测,菌株JY1-5初步鉴定为多粘类芽孢杆菌(Paenibacilluspolymyxa)。JY1-5在TSB与LB培养基中生长缓慢,培养72hOD600分别为0.30、0.29;其次为Glucose-Starch-CaCO3(GSC)、Landy、KatznelsonandLochhead(KL)、PDB 培养基,培养72 h后OD600分别为1.59、1.39、1.37和1.07;在NB培养基中细菌生长最快,培养72 h菌体浓度可达OD600 1.66。培养基NB、PDB、KL、GSC培养后,菌体抗菌物质有较高的抑菌活性,抑菌率分别为84.7%、85.2%、80.5%和76.1%。培养基KL、Landy、PDB培养滤液有较高抑菌活性,抑菌率分别为85.9%、81.9%和88.6%,其他培养基显示较弱的抑菌活性甚至没有抑菌活性。使用KL和PDB培养细菌时,培养滤液和菌体提取物均具有较强抑菌活性,但菌体抗菌物质抑菌活性明显高于培养滤液。本文选择KL培养基筛选抗菌物质产生的最佳培养时间,结果显示,培养36h以内,细菌浓度、培养滤液与菌体抗菌物质的抑菌活性均呈上升趋势,在36 h达到最大值,之后随着时间的推移逐渐呈下降趋势。菌体中提取的抗菌物质抑菌谱广,对水稻纹枯病菌、桃褐腐病菌、黄瓜枯萎病菌、稻瘟病菌、小麦全蚀病菌、油菜菌核病菌、番茄灰霉病菌、黄瓜枯萎病菌、瓜果腐霉病菌、马铃薯疮痂病菌、野油菜黄单胞菌及马铃薯疮痂病菌均显示出一定的抑菌效果。在室内番茄果实接种实验中,菌体抗菌物质对灰霉病菌的抑菌率达到80%以上。菌体抗菌物质的基质辅助激光解离飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF Mass Spectrometry,MALDI-TOF/TOF-MS)数据显示,出现 m/z= 869.50,883.54,897.54,901.54,915.55,929.58,947.53,965.53,979.55 的峰值,其与杀镰菌素(fusaricidin)环状多肽类抗生素分子量相同。根据其二级质谱分析分子量为883.54和897.54化合物,从其断裂方式和离子碎片峰得出与fusaricidins分子结构相似,最终确定分子量m/z 883.54的离子为Fusaricidin A,分子量 m/z 897.54 的离子为 Fusaricidin B。除产生杀镰菌素外,JY1-5还可以产生胞外水解酶,包括纤维素酶、几丁质酶、蛋白酶、解淀粉酶,不产生氢氰酸(HCN)、嗜铁素,不具有解磷固氮作用。上述结果为多粘类芽孢杆菌JY-5在番茄灰霉病防治中的应用提供重要参考价值。