观察健脾化瘀法中药对于肝癌细胞SMMC7721增殖抑制以及侵袭迁移的影响

来源 :广州中医药大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:tuniao1
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研究目的:观察健脾化瘀法中药对人类肝癌细胞株SMMC-7721增殖、侵袭迁移能力的影响。研究方法:根据血清药理学研究原理,用经健脾化瘀法中药水煎剂灌胃的Wistar大鼠的含药血清以及未经中药灌胃的正常空白血清,对人类肝癌细胞株SMMC-7721进行体外培养,进行细胞实验。实验中对照组给予含有10%正常血清细胞培养基,实验组给予含有10%、20%含药血清细胞培养基。①通过CCK-8法比色实验分别对培养48h、72h后的对照组和实验组细胞进行检测,计算其吸光度OD值以及细胞增殖抑制率,三组间均数分析使用单因素方差分析,两两组间分析运用LSD分析,两组相关数据间比较使用配对样本t检验方法,P<0.05为差异有统计学意义;观察健脾化瘀法中药对肝癌细胞SMMC-7721的增殖抑制作用。②通过细胞划痕实验测量并计算24h、48h后的对照组和实验组细胞的细胞迁移速率、迁移抑制率,三组间均数分析使用单因素方差分析,两两组间分析运用LSD分析,两组相关数据间比较使用配对样本t检验方法,P<0.05为差异有统计学意义;观察健脾化瘀法中药对肝癌细胞SMMC-7721迁移能力的抑制作用。③通过Transwell侵袭性实验观察并计算24h、48h后的对照组和实验组发生侵袭的细胞个数和侵袭抑制率,三组间均数分析使用单因素方差分析,两两组间分析运用LSD分析,两组相关数据间比较使用配对样本t检验方法,P<0.05为差异有统计学意义;观察健脾化瘀法中药对肝癌细胞SMMC-7721侵袭能力的抑制作用。实验结果:①CCK-8法结果:健脾化瘀法中药对SMMC-7721的增殖具有抑制作用,在给药后48h,20%含药组与10%正常组比较OD值明显降低(P<0.05);在给药后72h,10%、20%含药血清组0D值较10%正常血清组均明显降低(P<0.05);在给药后48h、72h后,20%含药血清组的增殖抑制率均明显高于10%含药血清组(P<0.05);比较20%含药血清在给药72h后的抑制率较48h时明显增高。②细胞划痕实验:在给药后24h、48h,10%含药、20%含药与10%正常比较愈合速率均明显降低(P<0.05);20%含药浓度下,24h与48h的迁移速率明显降低(P<0.05);在给药48h后,20%含药血清对迁移的抑制率较10%含药血清明显增高(P<0.05)。③在Transwell侵袭性实验:在给药48h后20%、10%含药血清组与10%正常血清组比较,发生侵袭的细胞数均明显减少(P<0.05);10%含药、20%含药组在给药48h后细胞数较给药24h的穿膜的细胞个数明显减少(P<0.05),在给药48h后,20%含药组的穿膜细胞个数较10%含药组明显减少。结论:健脾化瘀法中药对肝癌SMMC-7721细胞的活性、细胞增殖、侵袭迁移均具有抑制作用,并具有一定的浓度依赖性;同时低浓度含药血清的对细胞增殖抑制作用表现出一定的时效性。
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