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[目 的]本课题拟探讨原发性胆汁性胆管炎(primary biliary cholangitis,PBC)患者肝脏组织中激活转录因子 3(activating transcription factor 3,ATF3)和信号转导抑制因子-3(suppressor of cytokine signalling-3,SOCS3)的表达及其与PBC疾病进展的相关性;探讨ATF3与SOCS3在PBC发病中的可能作用。[方 法]收集昆明医科大学第二附属医院经病理确诊为PBC患者的肝脏穿刺组织共13例,其中早期患者(Ⅰ期:胆管炎期、Ⅱ期:汇管区周围炎期)6例,晚期患者(Ⅲ期:进行性肝纤维化期、Ⅳ期:肝硬化期)7例。免疫组织化学染色检测PBC患者肝穿组织中ATF3和SOCS3的表达,双重免疫荧光染色检测PBC患者肝组织中ATF3与CD68、CD4、CD8共定位情况,观察ATF3和SOCS3在PBC肝组织中的表达,分析ATF3和SOCS3的表达与PBC疾病进展的相关性。体外培养人单核细胞THP-1,并利用佛波酯将其分化为巨噬细胞,以1ug/ml 脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)分别刺激 THP-1 和 THP-1 来源巨噬细胞构建体外炎症模型;LPS刺激后利用RT-qPCR和Western-blot分别检测THP-1和巨噬细胞中ATF3、SOCS3的表达;以携带ATF3-shRNA的慢病毒转染THP-1细胞,采用RT-qPCR和ELISA检测巨噬细胞中IL-6、TNF-α、IL-10的表达变化,Western-blot检测巨噬细胞中SOCS3的蛋白质表达变化;染色质免疫共沉淀(CHIP)检测巨噬细胞中ATF3与SOCS3启动子结合情况;ATF3抑制后在LPS刺激下Western-blot检测SOCS3/p-STAT3通路蛋白STAT3、p-STAT3表达情况。[结 果]PBC患者肝穿组织免疫组化染色结果示ATF3阳性表达于炎性浸润部位,且随疾病进展表现出降低趋势;双重免疫荧光染色结果示ATF3与CD68、CD4、CD8共定位,在kupffer细胞、CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞中阳性表达;SOCS3免疫组化染色结果示SOCS3在PBC患者肝组织炎性浸润部位阳性表达,且早期较晚期显著。在THP-1细胞中,LPS显著诱导ATF3和SOCS3的表达,差异有统计学意义(P<0.05),而在THP-1来源巨噬细胞中,ATF3和SOCS3表现出降低趋势(P<0.05);ATF3-shRNA抑制ATF3基因表达后,ATF3的mRNA和蛋白质表达显著降低(P<0.05);与阴性对照组相比,LPS诱导下 ATF3-shRNA 组中 IL-6、TNF-α、IL-10 表达显著升高(P<0.05);ATF3下调后Western-blot检测显示巨噬细胞中SOCS3蛋白表达降低(P<0.05),CHIP显示ATF3与SOCS3启动子结合;在LPS刺激下,与阴性对照组相比,ATF3-shRNA 组 p-STAT3 活化增强。[结 论]ATF3和SOCS3在PBC患者肝脏组织炎性浸润部位高表达,均表现出早期高于晚期的趋势;在THP-1来源巨噬细胞中,LPS刺激下ATF3起负性调节炎症因子的作用,ATF3可能通过SOCS3/p-STAT3信号通路调节免疫反应参与PBC的发生发展。