海南番木瓜采后病害病原菌鉴定及香芹酚对炭疽病菌(Colletotrichum okinawense)的抑菌机理

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番木瓜(Carica papaya)为多年生肉质草本植物,是一种热带常绿果树。番木瓜果实营养成分含量高,多汁味甜,深受大众的喜爱。番木瓜是呼吸跃变型水果,在后熟过程中,潜伏侵染的病原菌活跃而迅速发病,果实腐烂,严重影响果实品质。尤其炭疽病菌潜伏期长,且分类复杂,发病可为害整个果面,是番木瓜发生最严重的采后病害之一。天然植物活性成分香芹酚(Carvacrol,C10H14O)具有良好的抑菌活性,是牛至精油的主要成分,具有无毒、无残留、环境友好的特点以及广泛的抑菌作用,是目前应用广泛的重要香料和防腐剂。以此为动向,本研究从以下3方面开展研究:海南省番木瓜果实采后病害病原菌鉴定、测定香芹酚与牛至精油的抑菌活性、香芹酚对番木瓜炭疽病菌(Colletotrichum okinawense)的抑菌机理;以期为今后研究植物活性成分防治番木瓜采后病害提供参考依据。主要研究结果如下:1.海南省番木瓜采后病害病原菌鉴定本论文鉴定的番木瓜采后病害病原菌有冲绳炭疽菌(C.okinawense)、暹罗炭疽菌(C.siamense)、热带炭疽菌(C.tropicale)、茄孢镰刀菌(Fusarium solani)、可可毛色二孢菌(Lasiodiplodia theobromae)和间座壳溃疡病菌(Diaporthe cf.heveae)等共6种。其中,冲绳炭疽菌(C.okinawense)在我国大陆地区番木瓜上首次报道,热带炭疽菌(C.tropicale)和间座壳溃疡病菌(Diaporthe cf.heveae)在番木瓜上首次报道。2.香芹酚和牛至精油的抑菌效果比较室内毒力测定结果表明,香芹酚和牛至精油均具有较好的抑菌效果,香芹酚对供试6株菌株的平均EC50值为0.089μL/m L;牛至精油对供试6株菌株的平均EC50值为0.161μL/m L。香芹酚对对供试菌株的平均EC50值低于牛至精油对供试菌株的平均EC50值,其抑菌效果优于牛至精油的抑菌效果。3.香芹酚对冲绳炭疽菌(C.okinawense)的抑菌机理探究3.1香芹酚处理对冲绳炭疽菌(C.okinawense)生长发育的影响采用含药平板法,以EC50值(0.057μL/m L)浓度香芹酚处理冲绳炭疽菌(C.okinawense)后,孢子萌发率比对照降低50%;菌丝生长量与对照减少了79.26%;扫描电镜观察显示,香芹酚处理后,菌丝出现严重变形、干瘪、皱缩和断裂等情况,分生孢子皱缩变形、失去继续生长发育的能力。3.2香芹酚处理对冲绳炭疽菌(C.okinawense)细胞壁及细胞膜的影响以EC50值(0.057μL/m L)浓度香芹酚处理冲绳炭疽菌(C.okinawense)后,扫描电镜和透射电镜观察显示,出现细胞壁薄厚不均、壁膜间界线不清晰,胞内出现大量空泡,细胞器无法辨认等情况;菌丝体几丁质酶活性增强,细胞壁消解,细胞膜透性变大,可溶性蛋白、可溶性还原糖和可溶性总糖均泄露。3.3香芹酚处理对C.okinawense呼吸及能量代谢的影响以EC50值(0.057μL/m L)浓度香芹酚处理冲绳炭疽菌(C.okinawense)后,菌丝体呼吸速率降低;细胞内ATP酶活性降低,处理后胞内Na+K+-ATP酶和Ca++Mg++-ATP酶活性持续下降;ATP含量随处理时间的延长而持续降低;TCA循环中的两个关键酶SDH和MDH活性随着处理时间的延长持续下降。
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