论文部分内容阅读
Palladin作为肌动蛋白(actin)相关蛋白家族的一员,现在正被人们所广泛关注。其在真核细胞中广泛表达,参与细胞中细胞骨架的构建以及细胞信号通路的信号传导在细胞中行使各种功能。本论文中我们主要关注Palladin对细胞分化的影响以及其与肿瘤细胞侵袭性的关系。在研究palladin对细胞分化影响部分,我们关注NGF(神经生长因子)诱导PC12(大鼠嗜铬瘤细胞)向类神经细胞分化的过程,设计实验从正反两方面证明palladin对PC12分化的影响,一方面,我们构建了palladin基因表达沉默载体pGenesil-1-R-palladin-RNAi,用以沉默PC12中palladin的表达,同时加入NGF,观察palladin基因沉默对NGF诱导PC12向类神经细胞分化过程的抑制作用;另一方面,我们把实验室原有的palladin真核表达载体pEGFP C3-MPF导入PC12中,检测外源表达palladin对PC12细胞分化程度的影响;实验结果表明:外源表达palladin能够促进PC12细胞向类神经细胞转化,而沉默表达palladin能够有效的抑制NGF诱导的PC12细胞分化过程,从必要和充分两方面证明了palladin在神经细胞分化过程中起到重要作用。在研究palladin与肿瘤细胞侵袭性关系部分,首先我们检测MCF7、HeLa和HT1080三种癌细胞的侵袭能力,并同时检测其中palladin的内源表达,发现palladin表达水平MCF7<HeLa<HT1080,细胞的侵袭能力也呈相同趋势。之后调节palladin表达水平的实验又证明沉默palladin表达会导致HeLa和HT1080细胞侵袭能力下降(MCF7细胞系因内源表达低而未出现明显差异),但外源表达palladin对细胞的侵袭能力没有明显影响。本文通过对palladin影响神经细胞分化以及促进癌细胞侵袭功能的研究,对palladin体内作用原理体系进行了丰富,palladin对神经细胞分化影响部分为我们研究神经创伤修复以及神经退行性疾病的治疗提供了新的视角;palladin与肿瘤细胞侵袭性关系部分则进一步加强了palladin与肿瘤细胞的发生和发展之间的联系,为研究肿瘤细胞转移方面的研究提供理论支持,并为癌症的治疗提供新的靶点。