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YopE是鼠疫菌六种分泌蛋白之一，在鼠疫的致病过程中起重要作用。在宿主细胞内，YopE作为GTP水解酶，通过其144位―精氨酸手指‖结构与细胞膜藕联蛋白RhoGTP酶相互作用使该酶由活性状态转化为非活性状态，导致细胞骨架蛋白actin的降解，使感染细胞受损。如果将其144位的精氨酸突变为丙氨酸（YopE(R144A)）则YopE不具有GAP活性。核转录因子NF-κB （Nuclear factor-κB）是响应环境变化的一个至关重要的转录因子，是进化上高度保守的信号模块，广泛存在于哺乳动物细胞中。在许多生物过程，如机体的炎症反应、免疫反应、细胞分化与凋亡及其他应激反应等，发挥着至关重要的作用。本实验室前期通过酵母双杂交筛库及阵列筛选发现YopE与p65存在相互作用，提示YopE与p65的相互作用可能在鼠疫菌的感染过程中起重要的作用。本研究通过免疫共沉淀，GST-Pull Down实验证明YopE与p65确实存在相互作用。GST-Pull Down实验确定YopE与p65的相互作用结构域为YopE(1-49aa、88-99aa)和p65(201-312aa)，其中YopE的88-99肽段在与p65的相互作用中起重要作用。报告基因实验证明，转染早期YopE以不依赖GAP活性方式显著激活NF-κB通路。间接免疫荧光实验发现YopE能促进p65入核。表达YopE上调NF-κB下游靶基因，其中明显上调NF-κB下游的抗凋亡和炎症反应基因。抑制NF-κB通路增加YopE诱导的细胞凋亡。机制上，我们发现YopE能明显促进p65与IκBα的解离。本文同时还构建了YopE/YopE(R144A)的可诱导表达系统，并用该系统验证了上述实验结果。此外，本文还采用可诱导表达系统研究了YopE/YopE(R144A)对HeLa细胞生物学特性的影响。发现YopE明显抑制Rosup所引起的细胞ROS产生、阻滞细胞周期、促进p21蛋白表达。综上，本研究发现YopE通过与p65的相互作用促进NF-κB活化，并提高细胞的存活能力，可能在鼠疫菌早期的感染过程中起到重要的作用。